Dokument: Zelluläre Funktionen und Interaktionen des Translokations-assoziierten Membranproteins 1 (TRAM 1)

Titel:	Zelluläre Funktionen und Interaktionen des Translokations-assoziierten Membranproteins 1 (TRAM 1)
Weiterer Titel:	Cellular functions and interactions of the translocation-associated membrane protein 1 (TRAM 1)
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=7821
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20080519-095042-4
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Grubenbecher, Stephanie [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 7,39 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 14.05.2008 / geändert 14.05.2008
Beitragende:	Prof. Dr. Carsten Korth [Betreuer/Doktorvater] Prof. Dr. Willbold, Dieter [Gutachter]
Stichwörter:	TRAM 1, Translokation, neurodegenerative Erkrankungen
Dewey Dezimal-Klassifikation:	500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie
Beschreibungen:	Neurodegenerative Erkrankungen sind gekennzeichnet durch Proteinaggregate, die meist durch Proteinfehlfaltung hervorgerufen werden. Zusätzlich zu Proteinfehlfaltungen sind für einige Proteine Faltungsvariationen beschrieben worden, die unabhängig von Mutationen oder krankheitsbedingten Fehlfaltungen sind. So liegt zum Beispiel das Prion Protein invitro und invivo in drei verschiedenen Topologien vor. Translokations-assoziierte Faktoren (TraF) - Glykoproteine unbekannter Identität - sind an der Biogenese der verschiedenen PrP-Isoformen (secPrP, CTMPrP, NTMPrP) invitro beteiligt. Ein potentielles Mitglied der TraFs ist das Translokations-assoziierte Membranprotein1 (TRAM1). TRAM1 ist ein etwa 36kDa großes Glykoprotein mit mehreren Transmembrandomänen, das zusammen mit dem Protein-Transportprotein Komplex Sec61p und dem Signalsequenz-Erkennungspartikel-Rezeptor SSR (Signal Sequence Recognition Particle Receptor) das Grundgerüst des Translokons im endoplasmatischen Reticulum bildet. In der vorliegenden Arbeit konnte gezeigt werden, dass TRAM1 in direkter Interaktion mit den b-Untereinheiten von Sec61p und SSR steht. Zudem wurden die Ras-verwandten Proteine Rab-3A und Rab-10 und das Dihydropyrimidinase-verwandte Protein-2 (DRP-2) als Interaktionspartner von TRAM1 nachgewiesen. Auch die Tatsache, dass TRAM1 in Gehirnen von Patienten mit Schizophrenie signifikant geringer exprimiert war als in Normalgehirnen, könnte auf eine Beteiligung von TRAM1 bei Schizophrenie hindeuten. Auf die Expression der Schizophrenie-assoziierten Proteine Neuregulin1, Dysbindin, Catechol O-methyltransferase und Tyrosin Hydroxylase hatte die Überexpression und Suppression von TRAM1 jedoch keine Auswirkung. Das Enzym Puromycin-sensitive Aminopeptidase (PSA) als Interaktionspartner weist auf eine Rolle von TRAM1 bei neurodegenerativen Erkrankungen hin. Dieses wird dadurch unterstützt, dass die Suppression von TRAM1 in Zellkultur zu einer erhöhten Expression des Prion Proteins und somit auch zu einer erhöhten Bildung des infektiösen PrPSc führte. Auf die Expression des Amyloid Precursor Proteins APP hatte die Suppression von TRAM1 eine gegenteilige Auswirkung. In APP695sw-stabil transfizierten Zellen konnte durch die Suppression von TRAM1 weniger APP detektiert werden. Die gleichbleibende Sekretion von Antikörpern in TRAM1-supprimierten Hybridoma-Zelllinien 7VC und 19B10 und den dazugehörigen Kontrollen legt die Vermutung nahe, dass die Funktion von TRAM1 hinsichtlich der Antikörpersekretion von anderen Proteinen übernommen wird. Kandidaten hierfür sind die Proteine TRAM2 (Translokations-assoziiertes Membranprotein2) und TRAM1L1 (Translokations-assoziiertes Transmem-branprotein1 ähnliches Protein1). Neurodegenerative diseases are characterised by deposition of protein aggregates caused by protein misfolding or misprocessing. In addition to protein misfolding diseases, conformational heterogeneity modulated by translocational events during protein biogenesis has been described for some proteins. For the prion protein, three different topologies are found invitro and invivo. Translocation-associated Factors (TraF) are involved in the biogenesis of the various conformational PrP-isoforms (secPrP, CTMPrP, NTMPrP) invitro. A potential member of the TraF family is the translocating chain-associating transmembrane protein1 (TRAM1). TRAM1 is a multispanning transmembrane glycoprotein of 36 kDa. Together with the Sec61p complex and the Signal Sequence Recognition Particle Receptor SSR, TRAM1 forms the translocon in the endoplasmatic reticulum. In this thesis is shown that TRAM1 interacts directly with the b-subunits of Sec61p and SSR. Furthermore, the Ras-related proteins Rab-3A and Rab-10 and the dihydropyrimidinase-related protein-2 (DRP-2) have been identified as binding partners of TRAM1. This and the fact that TRAM1 expression is significantly decreased in schizophrenia, could suggest a role for TRAM1 in this disease, although the overexpression and suppression of TRAM1 has no influence on the expression of the schizophrenia-associated proteins neuregulin1, dysbindin, catechol O-methyltransferase and tyrosin hydroxylase. A role for TRAM1 in neurodegenerative diseases has been suggested based on its potential interaction with the enzyme puromycin-sensitive aminopeptidase (PSA). In an independent set of experiments, it was shown that suppression of TRAM1 has an effect on expression of prion disease- and Alzheimer’s disease-related proteins PrP and APP. In cell culture TRAM1 suppression increases expression of prion protein (PrPC and PrPSc) and decreases expression of amyloid precursor protein (APP). TRAM1 suppression showed no effect on the secretion of antibodies in hybridoma cell lines. This suggests that the function of TRAM1 can be compensated by other proteins such as TRAM2 (translocation chain-associated membraneprotein2) or TRAM1L1 (translocation chain-associated membraneprotein1-like protein1).
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie
Dokument erstellt am:	14.05.2008
Dateien geändert am:	14.05.2008
Promotionsantrag am:	11.01.2008
Datum der Promotion:	15.04.2008