Dokument: Immunologisches Mikromilieu des duktalen Adenokarzinoms des Pankreas und seiner Vorläuferläsionen im Mausmodell
| Titel: | Immunologisches Mikromilieu des duktalen Adenokarzinoms des Pankreas und seiner Vorläuferläsionen im Mausmodell | |||||||
| Weiterer Titel: | Immunological microenvironment of precursor lesions of pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) in a transgenic mouse model | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=74676 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20261020-121521-7 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Müller, Carolin Maria Magdalena [Autor] | |||||||
| Dateien: |
| |||||||
| Beitragende: | Univ.-Prof. Dr. med. Irene Esposito [Gutachter] Prof. Dr. med. Keitel-Anselmino, Verena [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Das duktale Adenokarzinom des Pankreas (PDAC) ist derzeit eine der tödlichsten Krebsarten mit steigender Inzidenz. Bisher ist bekannt, dass die Immunmikroumgebung (immune microenvironment, iME) eine zentrale Rolle im biologischen Verhalten vom PDAC spielt. In diesem Zusammenhang ist eine eingehende Charakterisierung des iME des PDAC und seiner Vorläuferläsionen relevant.
Ziel dieser Arbeit war es, frühe Veränderungen zu identifizieren, welche die Tumorgenese der Bauchspeicheldrüse beeinflussen könnten, wozu die iME von normalem Pankreasgewebe, der azinär-duktalen-Metaplasie (ADM), von intraepithelialen Pankreasneoplasien (PanIN) und PDAC im p48Cretg/+; LSL-KrasG12D/+ (KC)- und p48Cretg/+; LSL-KrasG12D/+; p53flox/flox (KPC)-Mausmodell ausführlich charakterisiert wurde. Tissue Microarrays (TMAs) basierend auf einem Kollektiv von 41 transgenen Mäusen wurden konstruiert. Die TMAs umfassten 140 Gewebestanzen aus normalem Pankreasgewebe, Vorläuferläsionen wie PanIN (n=31) und ADM (n=21) sowie PDAC (n=70). Eine Tyramid-basierte Multiplex-Immunfluoreszenzfärbung wurde angewendet, um Immunzellen unter Verwendung verschiedener Zellmarker (CD3, CD4, CD8a, FoxP3, PD-1, CD19, F4/80, CD163, Tryptase und Granzym B) gleichzeitig auf einem Objektträger zu identifizieren. Mithilfe der ImageJ/FIJI-Software wurden die verschiedenen Zelltypen quantifiziert und anschließend auf alle DAPI⁺-Zellen (Gesamtzahl aller kernhaltigen Zellen) und die Gesamtfläche des untersuchten Gewebes normalisiert. Dies wurde durch die Entwicklung von Makros automatisiert und standardisiert. Die Daten wurden statistisch analysiert (Kruskal-Wallis-Test, gefolgt von Dunn-Bonferroni-Post-hoc-Vergleich). Immunzellen wurden hauptsächlich im Stroma um die Läsionen herum gefunden. Die Menge an Immunzellen war generell höher in PanIN und PDAC im Vergleich zu Normalgewebe und teilweise auch zu ADM. PanIN zeigten im Vergleich zu ADM eine signifikant höhere Anzahl von CD19⁺-B-Zellen (p = 0,026). Im PDAC waren Zellen der angeborenen Immunantwort, wie F4/80⁺-Makrophagen (p = 0,012) und Tryptase⁺-Mastzellen (p = 0,001), in signifikant höherer Menge vorhanden als in ADM, insbesondere in der Tumorperipherie. Darüber hinaus zeigten PDAC-Proben eine immunsuppressive Mikroumgebung, die durch eine Tendenz zu einer erhöhten Anzahl regulatorischer T-Zellen gekennzeichnet war. Zusammenfassend zeigen die Ergebnisse, dass das iME während der Pankreastumorgenese bei Mäusen ein dynamischer und heterogener Prozess zwischen verschiedenen Vorläuferläsionen ist, was auf eine aktive Rolle des iME bei der PDAC-Progression hindeutet.Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is currently one of the deadliest cancers with a rising incidence. So far it is known that the immune microenvironment (iME) plays a pivotal role in the biological behavior of PDAC. In this context, an in-depth characterization of the iME of its precursor lesions is relevant. We aimed to identify early changes that could influence pancreatic tumorigenesis by characterizing the iME of normal pancreas tissue, acinar-to-ductal metaplasia (ADM), pancreatic intraepithelial neoplasia (PanIN) and PDAC in the p48Cretg/+; LSL-KrasG12D/+ (KC) und p48Cretg/+; LSL-KrasG12D/+; p53flox/flox (KPC) mouse models. Tissue Microarrays (TMAs) based on a collective of 41 transgenic mice were constructed. The TMAs included 140 tissue cores of normal pancreas tissue, precursor lesions such as PanIN (n=31) and ADM (n=21), as well as PDAC (n=70). Tyramide-based multiplex immunofluorescence staining was applied to identify immune cells using different cell markers (CD3, CD4, CD8a, FoxP3, PD-1, CD19, F4/80, CD163, Tryptase and Granzyme B) simultaneously on one slide. By using ImageJ/FIJI software, we counted positive cells, normalized to DAPI+ cells (all cells) and the total area of the lesion. We automatized and standardized cell counting as well as area calculation by developing macros. Data were analyzed statistically (Kruskal-Wallis test followed by Dunn-Bonferroni post-hoc comparison). Immune cells were mostly found in the stroma around the lesions. The number of immune cells was generally higher in PanIN and PDAC tissue compared to normal tissue and also partially to ADM. PanIN displayed significantly higher numbers of CD19⁺ B cells compared to ADM (p = 0.026). In PDAC, cells of the innate immune response, such as F4/80⁺ macrophages (p = 0.012) and tryptase+ mast cells (p = 0.001), were present in significantly higher amount than in ADM, especially in the tumor periphery. In addition, PDAC samples displayed an immunosuppressive microenvironment, characterized by a tendency towards increased numbers of regulatory T cells. To summarize, our results show that the iME during pancreatic tumorigenesis in mice is a dynamic and heterogeneous process among different precursor lesions, suggesting an active role of the iME in PDAC progression. | |||||||
| Lizenz: |  Dieses Werk ist lizenziert unter einer Creative Commons Namensnennung 4.0 International Lizenz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät » Institute » Institut für Pathologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 20.10.2026 | |||||||
| Dateien geändert am: | 20.10.2026 | |||||||
| Datum der Promotion: | 23.07.2026 |
