Dokument: Charakterisierung von Chondroitinsulfat-Proteoglykanen auf Brustkrebszelllinien, welche durch das rekombinante Malaria Protein rVAR2 gebunden werden
| Titel: | Charakterisierung von Chondroitinsulfat-Proteoglykanen auf Brustkrebszelllinien, welche durch das rekombinante Malaria Protein rVAR2 gebunden werden | |||||||
| Weiterer Titel: | Characterisation of chondroitin sulphate proteoglycans on breast cancer cell lines that are bound by the recombinant malaria protein rVAR2 | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=73383 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20260706-164908-6 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Trnka, Lara [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. rer. nat. Neubauer, Hans [Gutachter] Univ.-Prof. Dr. med. Stoecklein, Nikolas [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Das Mammakarzinom (MaCa) ist die häufigste Krebserkrankung der Frau. Um einen Tumor erfolgreich behandeln zu können, besteht das Ziel eine patientenspezifische Therapie zu finden, wofür eine Analyse der individuellen Tumorzellen erforderlich ist. Derzeit werden MaCa-Zellen durch Gewebe-
biopsien gewonnen. Diese stellen jedoch einen invasiven Eingriff dar und sind nicht immer durchführbar. Um Gewebebiopsien zu vermeiden, könnten zirkulierende Tumorzellen (Circulating Tumor Cells [CTCs]) aus einer Liquid Biopsy eine wichtige Rolle spielen. Es existieren multiple Methoden zur Gewinnung von CTCs, die beispielsweise auf epithelialen Markern basieren. Jedoch können diese epithelialen Marker während der Metastasierung herunterreguliert werden, was die Detektion der CTCs erschwert. Um auch solche CTCs zu finden und die Anzahl an detektierten CTCs zu erhöhen, kann das rekombinante Malariaprotein VAR2CSA (Variant Surface Antigen 2 Chondroitin Sulfate A (rVAR2) von Bedeutung sein. Das rVAR2 Protein bindet spezifisch an onkofetales Chondroitinsulfat (ofCS), welches auf der Oberfläche von Plazenta- sowie den meisten Tumorzellen vorhanden ist. In Vorarbeiten dieser Promotion konnte die Bindung von rVAR2 an MaCa-Zelllinien nachgewiesen werden. Das Ziel dieser Dissertation ist die Identifikation von ofCS-modifizierten Proteoglykanen auf MaCa-Zellen, welche von rVAR2 gebunden werden, sowie der Vergleich von rVAR2-Zielproteinen auf triple-negativen und luminalen MaCa-Zelllinien. Die ofCS-modifizierten Proteoglykane mehrerer MaCa-Zelllinien wurden durch einen rVAR2-basierten Pulldown aufgereinigt. Nach anschließender Massenspektrometrie-Analyse wurden mögliche rVAR2-Zielproteine auf MaCa-Zellen anhand einer Literaturrecherche ausgewählt und mittels Western Blot-Analyse validiert. Im Rahmen dieser Promotionsarbeit konnten insgesamt 16 potenzielle glykosylierte rVAR2-Zielproteine auf der Zelloberfläche von MDA-MB-231, MDA-MB-436 und MCF-7 Zellen identifiziert werden. Nach Validierung mittels Western Blot-Analyse wurden Neuropilin 1, CD44 sowie Laminin Subunit Gamma 1 als rVAR2-Zielproteine verifiziert. Zudem wurde nachgewiesen, dass die verwendeten triple-negativen MaCa-Zelllinien eine höhere Expression von Neuropilin 1, CD44 und Laminin Subunit Gamma 1 im Vergleich zu luminalen MCF-7 Zellen haben und rVAR2 vermehrt an triple-negative MaCa-Zellen bindet. Die vorliegende Promotionsarbeit verdeutlicht, dass rVAR2 eine vielversprechende Methode ist, um vor allem triple-negative MaCa-Zelllinien zu detektieren.Breast cancer is the most common cancer in women. To successfully treat the tumour, the goal is to find a patient-specific therapy, which requires an analysis of the individual tumour cells. Currently, breast cancer cells are obtained through tissue biopsies, which are thought invasive and not always feasible. To avoid tissue biopsies, circulating tumour cells (CTCs) from a liquid biopsy could play an important role. Multiple methods exist to obtain CTCs, which are for example based on epithelial markers. However, epithelial markers can be downregulated during metastasis, which makes the detection of CTCs more difficult. In order to find such CTCs and to increase the number of detected CTCs, the recombinant malaria protein VAR2CSA (Variant Surface Antigen 2 Chondroitin Sulfate A) (rVAR2) could be of importance. The rVAR2-protein binds specifically to oncofetal chondroitin sulfate (ofCS), which is present on the surface of placental cells as wells as most tumour cells. In preliminary work for this doctoral thesis, it has been shown that rVAR2 binds to breast cancer cell lines. The aim of this dissertation is to identify ofCS-modified proteoglycans on breast cancer cells which are bound by rVAR2 and to compare rVAR2-targets on triple-negative and luminal breast cancer cell lines. The ofCS-modified proteoglycans of several breast cancer cell lines were purified by an rVAR2-based pulldown. After subsequent mass spectrometric analysis, possible rVAR2-targets on breast cancer cells were selected based on literature research and validated by Western blot analysis. As part of this doctoral thesis a total of 16 potential glycosylated rVAR2-target proteins on the cell surface of MDA-MB-231, MDA-MB-436 and MCF-7 cells were identified. After validation by Western blot analysis, Neuropilin 1, CD44 as well as Laminin Subunit Gamma 1 could be verified as rVAR2-targets. In addition, it was shown that triple negative breast cancer cell lines show a higher expression of Neuropilin 1, CD44 and Laminin Subunit Gamma 1 compared to luminal breast cancer cells and that rVAR2 showed increased binding to those target proteins on triple-negative breast cancer cells. This dissertation shows that rVAR2 is a promising method to detect especially triple-negative breast cancer cells. | |||||||
| Lizenz: |  Dieses Werk ist lizenziert unter einer Creative Commons Namensnennung 4.0 International Lizenz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät | |||||||
| Dokument erstellt am: | 06.07.2026 | |||||||
| Dateien geändert am: | 06.07.2026 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 11.10.2025 | |||||||
| Datum der Promotion: | 19.05.2026 |
