Dokument: Untersuchungen der Rezeptoren Glykoprotein 130 und Interleukin-6 Rezeptor in Hinblick auf deren Komplexbildung, Signalwege und Präformation
| Titel: | Untersuchungen der Rezeptoren Glykoprotein 130 und Interleukin-6 Rezeptor in Hinblick auf deren Komplexbildung, Signalwege und Präformation | |||||||
| Weiterer Titel: | Investigations of the Glycoprotein 130 and Interleukin-6 Receptors with Regard to Their Complex Formation, Signaling Pathways, and Preformation | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=67106 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20241029-180227-7 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Seibel, Christiane [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. rer. nat. Scheller, Jürgen [Gutachter] Prof. Dr. Zurbriggen, Matias [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | Interleukin-6, Interleukin-6 Rezeptor, gp130, Rezeptorchimäre | |||||||
| Dokumententyp (erweitert): | Dissertation | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibungen: | Die durch Interleukin-6 (IL-6) induzierten Signalwege sind sowohl an physiologischen als auch pathophysiologischen Prozessen beteiligt, wobei ein Ungleichgewicht zu Autoimmunerkrankungen führen kann. Die schrittweise Assemblierung des hexameren/tetrameren IL-6-Signalkomplexes und deren Einfluss auf die Signaltransduktion ist bislang unzureichend erforscht, jedoch könnten anfängliche Unterschiede im Komplexaufbau weitreichende Konsequenzen haben.
In dieser Arbeit wurde ein hexamerer Komplex (2xIL-6:2xsIL-6R:2xsgp130) unter Verwendung rekombinanter, löslicher Proteine mittels Co-Immunpräzipitation (Co-IP) nachgewiesen. Um den Nachweis eines hexameren Komplexes (2xIL-6:2xIL-6R:2xgp130) an der Zelloberfläche zu ermöglichen, wurden neuartige Rezeptorchimären, bestehend aus der extrazellulären Domäne (EZD) des IL-6R sowie der Transmembran- und intrazellulären Domäne (TMD und IZD) von gp130, entwickelt und in Ba/F3-Zellen stabil integriert. Allerdings konnte ein membranständiger Hexamer durch diese Chimäre nicht nachgewiesen werden. Durch Weiterentwicklung der Rezeptorchimäre wurden Januskinasen und Tyrosinmotive auf verschiedene Rezeptorketten aufgeteilt. Zellbasierte Experimente zeigten, dass assoziierte Januskinasen durch Trans-Phosphorylierung Tyrosinmotive auf einer anderen Rezeptorkette phosphorylieren können. Die Signalaktivierung des synthetischen IL-6-Rezeptorkomplexes unterschied sich sowohl in Intensität als auch in Qualität deutlich von der des Wildtyps. Diese synthetischen Rezeptoren der IL-6-Familie bilden die Grundlage für maßgeschneiderte Signalkaskaden. Zusätzlich wurde nachgewiesen, dass die Assemblierung des Ligand-Rezeptorkomplexes an der Zelloberfläche einer spezifischen Abfolge folgt. Weiterhin zeigte sich, dass nicht die Transmembrandomäne, sondern die extrazelluläre Domäne an der Präformation von Hetero-/Homodimeren IL-6R- und gp130-Komplexen beteiligt ist.The signaling pathways induced by interleukin-6 (IL-6) are involved in both physiological and pathophysiological processes, with imbalances potentially leading to autoimmune diseases. The stepwise assembly of the hexameric/tetrameric IL-6 signaling complex and its impact on signal transduction have not been thoroughly investigated; however, initial differences in complex formation could have far-reaching consequences. In this study, a hexameric complex (2xIL-6:2xsIL-6R:2xsgp130) was demonstrated using recombinant soluble proteins via co-immunoprecipitation (Co-IP). To detect the presence of a hexameric complex (2xIL-6:2xIL-6R:2xgp130) on the cell surface, novel receptor chimeras were created, consisting of the extracellular domain (ECD) of IL-6R, as well as the transmembrane (TMD) and intracellular domains (ICD) of gp130, which were stably integrated into Ba/F3 cells. However, the membrane-bound hexamer could not be detected with this chimera. Through further development of the receptor chimera, Janus kinases and tyrosine motifs were split between different receptor chains. Cell-based experiments showed that associated Janus kinases could trans-phosphorylate tyrosine motifs located on another receptor chain. The signal activation of the synthetic IL-6 receptor complex differed significantly from the wild-type IL-6 receptor complex in both intensity and quality. These synthetic receptors of the IL-6 family form the basis for tailored signaling cascades. Additionally, it was demonstrated that the assembly of the ligand-receptor complex on the cell surface follows a specific sequence. Furthermore, it was shown that not the transmembrane domain but the extracellular domain is involved in the preformation of hetero-/homodimeric IL-6R and gp130 complexes. | |||||||
| Lizenz: |  Dieses Werk ist lizenziert unter einer Creative Commons Namensnennung 4.0 International Lizenz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät | |||||||
| Dokument erstellt am: | 29.10.2024 | |||||||
| Dateien geändert am: | 29.10.2024 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 17.08.2020 | |||||||
| Datum der Promotion: | 10.10.2024 |
