Dokument: Rekrutierungsfrequenzen von mGBP-Familienmitgliedern an intrazelluläre Pathogene

Titel:	Rekrutierungsfrequenzen von mGBP-Familienmitgliedern an intrazelluläre Pathogene
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=66740
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20240923-090251-5
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Henze, Pia Amelie [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 2,09 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 08.09.2024 / geändert 08.09.2024
Beitragende:	Prof. Dr. med. Pfeffer, Klaus [Gutachter] Prof. Dr. med. dent Hugger, Alfons [Gutachter]
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibung:	Die Infektion mit T. gondii ist nicht nur beim Menschen, sondern auch bei warmblütigen Tieren weltweit verbreitet (Clough and Frickel, 2017). Iimmunsupprimierte Menschen oder Frauen mit einer erstmaligen Infektion während einer Schwangerschaft gelten als gefährdet, an der Krank-heit Toxoplasmose zu erkranken (Kim and Weiss, 2008). Interferon- (IFN-) spielt eine wich-tige Rolle in der Stimulation von Abwehrmechanismen, die die T. gondii Replikation und Infek-tiösität beeinflussen (Clough and Frickel, 2017, Sturge and Yarovinsky, 2014). Guanylat-bindende Proteine (GBP) sind eine Familie von Dynamin-ähnlichen 65–73 kDa GTPasen, die als Reaktion auf Interferone und andere entzündungsfördernde Zytokine expri-miert werden (Praefcke, 2018, Boehm et al., 1998). Sie wurden als Schlüsselakteure bei der Vermittlung der Wirtsabwehr gegen intrazelluläre Pathogene wie z.B. T. gondii und bestimmte Viren erkannt (Santos and Broz, 2018). Insgesamt wurden 11 unterschiedliche GBPs (mGBP 1-11) bei Mäusen identifiziert, beim Menschen hingegen wurden bisher sieben GBPs (hGBP 1-7) beschrieben (Kresse et al., 2008, Kim et al., 2012). Die Rolle der mGBPs in der Bekämpfung des Erregers T. gondii konnte in Studien nachgewiesen werden (Degrandi et al., 2013). Es ist auch eine direkte Akkumulation von mGBP2 und mGBP7 an die parasitophore Vakuole (PV) beobachtet worden und dass mGBP2 und mGBP7-defiziente Mäuse nach T. gondii Infektion versterben (Steffens, 2020, Degrandi et al., 2007). In dieser Arbeit wurden die Rekrutierungs-frequenzen von mGBP7, mGBP6 und mGBP2 an das intrazelluläre Pathogen T. gondii detail-liert untersucht. Dabei wurde eine Quantifizierung der Akkumulation von mGBP6 an die PV vorgenommen. Die Methode der Wahl für die Analyse der Rekrutierungsfrequenzen war in vorherigen Forschungsarbeiten die Auswertung am Konfokalmikroskop. Teil dieser For-schungsarbeit war die Etablierung einer Methode zur vereinfachten Auszählung und Analyse von doppelt, mGBP transduzierten murinen embryonalen Fibroblasten (MEFs) unter Verwen-dung des Keyence Mikroskopsystems. Dafür wurde ein aus mehreren Einzelaufnahmen der Fluoreszenzfärbung zusammengesetztes Übersichtsbild hergestellt, welches über die Fiji-Software ausgewertet werden konnte. Die Ergebnisse der Zelllinien im Vergleich von zwei Stunden und sechs Stunden nach Infektion ergaben unterschiedliche Rekrutierungsfrequenzen der mGBP-Familienmitglieder. Es zeigte sich, dass mGBP2 am häufigsten an die PV rekrutiert wurde, gefolgt von mGBP7 und mGBP6. In beiden Zelllinien konnte eine Zunahme der PVs beobachtet werden, an denen beide mGBP-Fusionsproteine der Zelllinie rekrutiert wurden. Auf-fällig war, dass die Anzahl der doppelt positiven PVs bei den mGBP7-defizienten MEFs, die mit mGBP7 und mGBP2 kotransduziert worden sind, zu beiden Messzeitpunkten deutlich hö-her war als bei der mGBP7/mGBP6 transduzierten Vergleichs-Zelllinie.
Lizenz:	Dieses Werk ist lizenziert unter einer Creative Commons Namensnennung 4.0 International Lizenz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät » Institute » Institut für Medizinische Mikrobiologie
Dokument erstellt am:	23.09.2024
Dateien geändert am:	23.09.2024
Promotionsantrag am:	30.03.2024
Datum der Promotion:	05.09.2024