Dokument: Validierung der High-Resolution-Melting-Analyse zur Detektion epigenetischer Modifikationen bei systemischem Lupus erythematodes
| Titel: | Validierung der High-Resolution-Melting-Analyse zur Detektion epigenetischer Modifikationen bei systemischem Lupus erythematodes | |||||||
| Weiterer Titel: | Validation of high-resolution melting analysis for the detection of epigenetic modifications in systemic lupus erythematosus | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=66432 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20240807-133041-4 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Rosenbaum, Anna Veronica [Autor] | |||||||
| Dateien: |
| |||||||
| Beitragende: | Vordenbäumen, Stefan [Gutachter] PD Dr. Bosse, Hans Martin [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Epigenetische Modifikationen gelten als wichtige Einflussfaktoren in der komplexen Pathogenese des systemischen Lupus erythematodes (SLE). Zu einer dieser epigenetischen Modifikationen zählt die Methylierung von Cytosin. Eine globale Hypomethylierung von DNA in CD4+-T-Zellen von Patientinnen und Patienten mit SLE wurde bereits nachgewiesen. Auch der CD40-Ligand (CD40L) als co-stimulierender Faktor in der Aktivierung von B Zellen spielt eine pathogenetische Rolle beim SLE. T-Zellen von weiblichen SLE-Erkrankten zeigten eine erhöhte Expression von CD40L.
Die vorliegende Studie konzentrierte sich in einem ersten Schritt auf die Validierung der High Resolution-Melting(HRM)-Analyse als eine anwenderfreundliche Methode zum Nachweis von Methylierungen im CD40L-Promotor. Im Vergleich zur Massenspektrometrie-basierten Referenzmethode (EpiTYPER) erwies sich die HRM Analyse jedoch als unzureichend. In einem zweiten Schritt wurden die Ergebnisse der Methylierungsanalyse des EpiTYPERs von CD40L-Promotor- und CD40L-Enhancer Bereichen ausgewertet. Es galt zu überprüfen, ob das Methylierungsmuster als Biomarker für die Beurteilung der Krankheitsaktivität dienen kann. Hierfür wurde DNA aus CD4+-T-Zellen von 60 an SLE erkrankten Frauen untersucht. Die Ergebnisse wurden unter anderem mit der Krankheitsaktivität, gemessen am Systemic Lupus Disease Activity Index (SLEDAI), und serologischen Markern wie dem C reaktiven Protein (CRP) oder SLE-spezifischen Autoantikörpern korreliert. In der Auswertung der Methylierung einzelner Cytosin Guanin Dinukleotid(CpG)-Bereiche des CD40L-Promotors bei Frauen mit SLE zeigte sich eine Assoziation zwischen Hypomethylierung an Position CpG22 und SLEDAI sowie Hypomethylierung an Position CpG17 und erhöhten CRP-Werten. Die vorliegende Studie konnte somit einen Zusammenhang zwischen Krankheitsaktivität und Hypomethylierung an vereinzelten CpG-Loci des CD40L-Promotors bei Frauen mit SLE nachweisen.Epigenetic modifications are considered to be important influencing factors in the complex pathogenesis of systemic lupus erythematosus (SLE). One of these epigenetic modifications is the methylation of cytosine. Global hypomethylation of DNA in CD4+ T cells of patients with SLE has already been demonstrated. The CD40 ligand (CD40L) as a co-stimulating factor in the activation of B cells plays a role in the pathogenesis of SLE as well. T cells from female patients with SLE showed an increased expression of CD40L. In a first step, the study presented here focussed on validating high-resolution melting (HRM) analysis as a user-friendly method to detect methylation in the CD40L promoter. Compared to the reference method based on mass spectrometry (EpiTYPER), the HRM analysis proved to be insufficient. In a second step, the results of the EpiTYPER methylation analysis of CD40L promoter and CD40L enhancer regions were analysed. The aim was to verify whether the methylation pattern can serve as a biomarker for the assessment of disease activity. For this purpose, DNA from CD4+ T cells of 60 women diagnosed with SLE was analysed using the reference method (EpiTYPER). Results were then correlated with disease activity, measured by the Systemic Lupus Disease Activity Index (SLEDAI), and serological markers such as c reactive protein (CRP) or SLE-specific autoantibodies. Results of individually assessed specific cytosine guanine dinucleotides (CpG) in the CD40L promoter in women with SLE showed an association between hypomethylation at position CpG22 and SLEDAI as well as hypomethylation at position CpG17 and increased CRP values. In conclusion, it was possible to demonstrate an association between disease activity and hypomethylation in specific CpG loci of the CD40L promoter in women with SLE. | |||||||
| Lizenz: |  Dieses Werk ist lizenziert unter einer Creative Commons Namensnennung 4.0 International Lizenz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät Medizinische Fakultät | |||||||
| Dokument erstellt am: | 07.08.2024 | |||||||
| Dateien geändert am: | 07.08.2024 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 14.03.2024 | |||||||
| Datum der Promotion: | 25.07.2024 |
