Dokument: Proteasom-Inhibitoren als neue Therapieoptionen für ALK-mutierte Neuroblastome
| Titel: | Proteasom-Inhibitoren als neue Therapieoptionen für ALK-mutierte Neuroblastome | |||||||
| Weiterer Titel: | Proteasome inhibitors emerging as new therapy options for ALK-mutated neuroblastoma | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=64677 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20240130-095500-6 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Englisch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Jacobs, Johanna Katharina [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Reifenberger, Guido [Gutachter] Ghosh, Sujal [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | Neuroblastom, Ixazomib, ALK | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Das Neuroblastom (NB) ist ein bösartiger Tumor des peripheren sympathischen Nervensystems und der häufigste extrakranielle solide Tumor bei Kindern. Bei Hochrisikopatienten liegt die 5-Jahres-Überlebensrate mit den bestehenden multimodalen Therapieschemata (Chemotherapie, Resektion, Strahlentherapie) trotz intensiver Forschung in den letzten Jahren bei unter 50%. Neue Therapieoptionen sind deswegen notwendig. Eine Keimbahnmutation im Proto-onkogen Anaplastische Lymphomkinase (ALK) ist die häufigste Ursache für familiär-bedingte Neuroblastome. Ein internes Hochdurchsatz-Screening von verschiedenen Medikamenten zeigte eine höhere Empfindlichkeit von ALK-mutierten (mut) NB-Zelllinien gegenüber dem Proteasom-Inhibitor Ixazomib. Daher wurde in dieser Arbeit Ixazomib als zusätzliche Therapieoption für ALK-mut NB geprüft.
Das Ziel der Arbeit war es, zu untersuchen, ob der neue Proteasom-Inhibitor Ixazomib eine signifikant bessere Wirksamkeit in ALK-mut NB-Zelllinien im Gegensatz zu ALK-wildtyp (wt) NB-Zelllinien aufweist. Dafür wurden sechs verschiedene humane NB-Zelllinien verwendet: Kelly, SH-SY5Y und CLBGA als ALK-mut NB-Zelllinien sowie IMR 32, SK-N-FI und NBL-S als ALK-wt Zelllinien. Um den Effekt von Ixazomib auf ALK-mut und ALK-wt Zellen zu untersuchen, wurden verschiedene Assays zur Quantifizierung der Zellviabilität und -proliferation, Apoptoseaktivität und DNA-Schädigung durchgeführt. Um mögliche molekularbiologische Mechanismen von Ixazomib nachzuweisen, wurden realtime-PCR und Western Blot Analysen speziell zur Bestimmung der NF-κB-Expression durchgeführt, da bisherige Studienergebnisse nahelegen, dass NF-κB in den Wirkmechanismus von Proteasom-Inhibitoren involviert ist. Die Behandlung mit Ixazomib führte zu einer reduzierten Zellviabilität, hemmte die Zellproliferation, führte zu vermehrten Doppelstrangbrüchen und erhöhte die Apoptoseaktivität in ALK-mut NB-Zelllinien. Weder in ALK-wt noch in ALK-mut NB-Zellen wurde eine signifikante Ixazomib-induzierte Veränderung der NF-κB Expression beobachtet. Die Ergebnisse in dieser Arbeit deuten darauf hin, dass die Behandlung mit Ixazomib zu einer signifikanten Induktion von Zelltod in ALK-mut NB-Zelllinien führt. Daher könnte dieser relativ neue Proteasom-Inhibitor als zusätzliche Behandlungsoption für Patienten mit einem NB, das eine ALK-Mutation aufweist, dienen.Neuroblastoma (NB) is a malignant tumor of the peripheral sympathetic nervous system and the most common extracranial malignant solid tumor in children. For high-risk patients, the 5-year survival rate is less than 50% with existing multimodal therapy regimens (chemotherapy, resection, radiotherapy). Thus, new therapy options are required. The anaplastic lymphoma kinase (ALK) gene mutation is considered a proto-oncogene and is the most common inheritable mutation in NB. In-house high-throughput drug screening revealed higher sensitivity of ALK mutated (mut) NB cell lines towards ixazomib. Therefore, the proteasome inhibtor ixazomib was evaluated as an additional therapeutic strategy for ALK mut NB. The aim of this work was to determine whether the novel proteasome inhibitor ixazomib has a better efficacy in ALK mut NB cell lines in comparison to ALK wildtype (wt) NB cell lines. For this purpose, six commercially available human NB cell lines were investigated: Kelly, SH-SY5Y, CLBGA as ALK mut NB cell lines and IMR 32, SK-N-FI, NBL-S as ALK wt cell lines. To evaluate the effects of ixazomib treatment on ALK mut and ALK wt cells, various assays were performed to quantify cell viability and proliferation, apoptotic activity, and DNA damage. To assess possible molecular mechanisms of ixazomib, real-time PCR and Western blot analyses were performed specifically for detection of NF-κB expression, as previous study results suggested that NF-κB is involved in the mechanism of action of proteasome inhibitors. Ixazomib treatment led to reduced cell viability, inhibited cell proliferation and increased apoptosis. Furthermore, ALK mut cell lines showed increased DNA damage after ixazomib treatment. No significant ixazomib-induced alteration in NF-κB expression was observed, neither in ALK wt nor in ALK mut NB cells. In conclusion, the results summarized in this thesis indicate that ixazomib treatment leads to significant induction of the cell death machinery in ALK mut NB cell lines. Therefore, this relatively new proteasome inhibitor may serve as additional treatment option in patients with NB carrying an ALK mutation. | |||||||
| Lizenz: |  Dieses Werk ist lizenziert unter einer Creative Commons Namensnennung 4.0 International Lizenz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät | |||||||
| Dokument erstellt am: | 30.01.2024 | |||||||
| Dateien geändert am: | 30.01.2024 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 07.10.2023 | |||||||
| Datum der Promotion: | 16.01.2024 |
