Dokument: Untersuchung zum tageszeitlichen Rhythmus der purinergen P2-Rezeptoren im Urothel der Maus

Titel:	Untersuchung zum tageszeitlichen Rhythmus der purinergen P2-Rezeptoren im Urothel der Maus
Weiterer Titel:	Investigation on the diurnal rhythm of purinergic P2 receptors in mouse urothelium
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=63722
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20230928-104615-1
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Avanes Avakian, Gayaneh [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 2,39 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 20.09.2023 / geändert 20.09.2023
Beitragende:	Prof. Dr. von Gall, Charlotte [Gutachter] Prof. Dr. med. Filler, Timm J. [Gutachter]
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibungen:	Purinerge Rezeptoren werden in den Organen von Säugetieren und Menschen ubiquitär exprimiert und tragen zu unterschiedlichen Signalwegen bei, so auch in der Harnblase von Mäusen. Zahlreiche Studien stellen die funktionellen Eigenschaften einzelner purinerger Rezeptoren oder ihr Expressionsverhalten in den verschiedenen Geweben dar. In der vorliegenden Arbeit wurde zunächst eine detaillierte Analyse der Expression von insgesamt sieben P2X- und acht P2Y-Rezeptoren in den einzelnen Wandschichten der murinen Harnblase durchgeführt. Dabei wurde vor allem der Frage nachgegangen, ob die Expression der purinergen Rezeptoren der Harnblase der Maus einer tageszeitlichen Rhythmik unterliegt. Hierzu wurden 36 C57Bl/6 Mäuse in einem 12h-hell/12h-dunkel-Rhythmus gehalten. In einem Zeitraum von 24 Stunden wurden im Abstand von vier Stunden jeweils sechs Mäusen die Harnblasen entnommen, präpariert und eingefroren, um im Anschluss mikroskopische Harnblasen-Schnitte zu generieren und diese immunhistochemisch zu färben. Die Expression aller zu untersuchenden purinergen Rezeptoren konnte somit mikroskopisch sichtbar gemacht und fotografiert werden. Die Expressionsdichte im Urothel wurde für jeden einzelnen Rezeptor im tageszeitlichen Verlauf ermittelt und ausgewertet. Im zweiten Teil dieser Arbeit wurde das Miktionsverhalten von P2X7- und P2Y2-Knock Out-Mäusen untersucht, die ebenfalls im oben beschriebenen tageszeitlichen Rhythmus gehalten wurden. Die Ergebnisse zeigen, dass kein signifikanter Unterschied in der Quantität der Expression der untersuchten purinergen Rezeptoren zwischen der Licht- und der Dunkelphase im tageszeitlichen Verlauf besteht. Gleichwohl konnte gezeigt werden, dass das Urinvolumen von P2X7-deletierten Mäusen in der Dunkelphase signifikant höher ist als das Urinvolumen von Wildtyp-Mäusen, während bei P2Y2-deletierten Mäusen kein signifikanter Unterschied zu Wildtyp-Mäusen bestand. Die purinerge Signalgebung ist ein komplexes System, welches unter verschiedenen Einflüssen dynamischen Veränderungen unterliegt. In unterschiedlichen Studien wurde bereits gezeigt, dass unter pathologischen Bedingungen der Harnblase, wie beispielsweise bei Zystitiden, die Expressionsdichte purinerger Rezeptoren deutlich erhöht ist. Die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit zeigen, dass sich in einem für Mäuse physiologischen tageszeitlichen Rhythmus die Expression der purinergen Rezeptoren unter Licht und Dunkelheit nicht signifikant unterscheiden. Diese Ergebnisse können als Grundlage für weitere Forschungen genutzt werden, um insbesondere auch beim Menschen die Auswirkungen eines gestörten zirkadianen Systems auf die Entstehung von Pathologien des Urogenitalsystems, beispielsweise unter den Bedingungen von Schichtarbeit, zu beleuchten. Purinergic receptors are ubiquitously expressed in mammalian and human organs and contribute to various signalling pathways, including in the urinary bladder of mice. Numerous studies present the functional properties of individual purinergic receptors or their expression behaviour in different tissues. In the present study, we first performed a detailed analysis of the expression of a total of seven P2X and eight P2Y receptors in the individual wall layers of the murine urinary bladder. We investigated whether the expression of purinergic receptors in the mouse urinary bladder is subject to a diurnal rhythm. For this purpose, 36 C57Bl/6 mice were kept in a 12h-light/12h-dark rhythm. During a period of 24 hours, the urinary bladders of six mice were removed, dissected, and frozen at intervals of four hours for subsequent generation of microscopic urinary bladder sections and immunohistochemical staining. The expression of all purinergic receptors under investigation could thus be visualized microscopically and photographed. The expression density in the urothelium was determined and evaluated for each individual receptor in a diurnal course. In the second part of this work, the micturition behaviour of P2X7- and P2Y2-knockout mice was studied, which were also kept in the diurnal rhythm described above. The results show that there is no significant difference in the quantity of expression of the purinergic receptors studied between the light and dark phases in the diurnal cycle. Nevertheless, the urine volume of P2X7-deleted mice was shown to be significantly higher than the urine volume of wild-type mice in the dark phase, whereas there was no significant difference in P2Y2-deleted mice compared with wild-type mice. Purinergic signalling is a complex system that is subject to dynamic changes under various influences. Different studies have already shown that under pathological conditions of the urinary bladder, such as cystitis, the expression density of purinergic receptors is significantly increased. The results of the present work show that in a physiological diurnal rhythm for mice, purinergic receptor expression does not differ significantly under light and dark conditions. These results can be used as a basis for further research, especially in humans, to shed light on the effects of a disturbed circadian system on the development of pathologies of the urogenital system, for example under conditions of shift work.
Lizenz:	Dieses Werk ist lizenziert unter einer Creative Commons Namensnennung 4.0 International Lizenz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät » Institute » Institut für Anatomie II
Dokument erstellt am:	28.09.2023
Dateien geändert am:	28.09.2023
Promotionsantrag am:	25.11.2022
Datum der Promotion:	14.09.2023