Dokument: Eine bisher unbeschriebene homozygote Missense- Mutation als Ursache des Pseudohypoaldosteronismus Typ II

Titel:	Eine bisher unbeschriebene homozygote Missense- Mutation als Ursache des Pseudohypoaldosteronismus Typ II
Weiterer Titel:	A Novel Homozygous KLHL3 Mutation as a Cause of Autosomal Recessive Pseudohypoaldosteronism Type II
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=63127
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20230717-113536-0
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Etges, Annika [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 1,17 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 10.07.2023 / geändert 10.07.2023
Beitragende:	Prof. Dr. med. Scholl, Ute I. [Gutachter] Prof. Dr. med. Schott, Matthias [Gutachter]
Stichwörter:	Hypertonie, Genetik, Gordon-Syndrom, Pseudohypoaldosteronismus Typ II, KLHL3
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibungen:	Diese Arbeit beschäftigt sich mit dem Fall einer 58-jährigen Patientin mit arterieller Hypertonie, Hyperkaliämie, Muskelschmerzen und supprimiertem Plasma-Renin- Spiegel, bei welcher im Alter von 57 Jahren ein Pseudohypoaldosteronismus Typ II diagnostiziert wurde. Der Pseudohypoaldosteronismus Typ II, auch als Gordon-Syndrom bezeichnet, stellt eine Erkrankung aus dem Spektrum der monogenetischen Hypertonien dar. Diese Untergruppe der sekundären Hypertonien umfasst weitere seltene Erkrankungen wie den Familiären Hyperaldosteronismus, das Liddle-Syndrom und den Apparenten Mineralokortikoid-Exzess. Krankheitsverursachend sind beim Gordon-Syndrom Mutationen in den Genen WNK1, WNK4, CUL3 und KLHL3. Bei der hier untersuchten Patientin konnte mittels Sanger-Sequenzierung eine bisher unbeschriebene homozygote Missense-Mutation im KLHL3-Gen nachgewiesen werden, welches für das Protein Kelch-like-protein (KLHL) 3, eine Ubiquitin-Ligase, codiert. KLHL3 bildet einen E3-Ubiquitin-Ligase-Komplex mit dem Protein Cullin-3, welcher zu einer Ubiquitinylierung der „With-No-Lysine“-Kinasen WNK1 und WNK4 und in der Folge zu deren Abbau im Proteasom führt. Über diesen Signalweg erfolgt eine Regulierung des Thiazid-sensitiven Na-Cl-Cotransporters im distalen Tubulus. Wir führten eine zielgerichtete Mutagenese der KLHL3-cDNA durch und transfizierten COS7-Zellen mit der veränderten Plasmid-DNA. Mittels Western Blotting untersuchten wir die Effekte der p.Arg431Trp-Mutation auf die Expression von WNK4. Hier zeigte sich eine erhöhte WNK4-Expression, die sich durch eine verminderte Regulation durch KLHL3 erklären lässt. Molekulardynamik-Simulationen legten eine verminderte Stabilität des mutierten KLHL3-Proteins nahe. This work features a 58-year-old patient who presented with arterial hypertension, hyperkalemia, muscle pain und low plasma renin levels who was diagnosed with pseudohypoaldosteronism type II (PHA II) at the age of 57 years. PHA II or Gordon’s syndrome is a monogenic form of hypertension. This subgroup of secondary hypertension includes other rare entities such as familial hyperaldosteronism, Liddle’s syndrome and apparent mineralocorticoid excess. Disease-causing mutations in Gordon’s syndrome have been found in the WNK1, WNK4, CUL3 and KLHL3 genes. In the patient investigated here, a novel homozygous KLHL3 missense mutation was identified by Sanger sequencing. KLHL3 encodes kelch-like protein 3, a ubiquitin ligase that forms a E3 ubiquitin ligase complex by binding to cullin 3. Ubiquitination of the with-no-lysine- kinases WNK1 and WNK4 leads to their degradation in the proteasome. This pathway eventually causes downregulation of the thiazide sensitive Na-Cl-cotransporter in the distal tubule of the nephron. We performed site-directed mutagenesis of the KLHL3 cDNA and transfected COS7 cells with the mutated plasmid. We then investigated the effect of the p.Arg431Trp mutation on the expression of WNK4. We demonstrated an increased WNK4 expression caused by decreased KLHL3-dependent downregulation. Molecular dynamics simulations suggest a decreased stability of the mutated KLHL3 protein.
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Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	17.07.2023
Dateien geändert am:	17.07.2023
Promotionsantrag am:	09.02.2023
Datum der Promotion:	29.06.2023