Dokument: Die Rolle des antiapoptotischen Proteins ARC in einer embryonalen Rhabdomyosarkomzelllinie

Titel:	Die Rolle des antiapoptotischen Proteins ARC in einer embryonalen Rhabdomyosarkomzelllinie
Weiterer Titel:	The role of antiapoptotic protein ARC in an embryonal rhabdomyosarcoma cell line
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=63104
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20230726-104643-4
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Zlachevska, Viktoriya AnatolÌїvna [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 2,32 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 06.07.2023 / geändert 06.07.2023
Beitragende:	PD Dr. rer. nat. Mahotka, Csaba [Gutachter] Prof. Dr. rer. nat. Suschek, Christoph V. [Gutachter]
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibungen:	Als häufigster maligner Weichteiltumor bei Kindern spricht das Rhabdomyosarkom vor allem in fortgeschrittenen Stadien nur schlecht auf konventionelle Chemo- und Radiotherapie an. Die Entwicklung neuartiger zielgerichteter Tumortherapeutika ist daher essenziell für die Verbesserung der Prognose betroffener Patienten. In Zellen zahlreicher Tumorentitäten ist die Balance zwischen pro- und antiapoptotischen Molekülen zugunsten apoptosehemmender Signalwege nachweislich gestört. Auf diese Weise entkommen Tumorzellen dem natürlichen Zelltod, der Apoptose, und entwickeln Resistenzen gegenüber Krebsmedikamenten. Für einen wichtigen Vertreter der antiapoptotischen Proteine, ARC, wurde in Vorarbeiten eine deutliche Überexpression im embryonalen Rhabdomyosarkom entdeckt. In dieser Arbeit wurde die Rolle von ARC bei der intrinsischen und extrinsischen Apoptose in der embryonalen Rhabdomyosarkomzelllinie TE-671 untersucht, indem seine Expression dauerhaft herabgesetzt wurde. Anschließend wurden die TE-671-Zellen nach dem Knock-down von ARC mit ABT-263, einem Inhibitor der antiapoptotischen Proteine Bcl-2, Bcl-xL und Bcl-w, behandelt. ABT-263 konnte als ein Induktor von intrinsischer und in geringerem Maße extrinsischer Apoptose in TE-671-Zellen bestätigt werden. ARC war sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma der Rhabdomyosarkomzellen lokalisiert. Es zeigte sich kein signifikanter Einfluss von ARC auf den intrinsischen Apoptosesignalweg im Rhabdomyosarkom. Die Resistenz der TE-671-Zellen gegenüber ABT-263 konnte nicht durch einen Knock-down von ARC überwunden werden. Dies könnte an der Überexpression des antiapoptotischen Proteins Mcl-1 und seiner fehlenden Regulierung durch ARC in Rhabdomyosarkomzellen liegen. Interessanterweise hatte ARC einen fördernden Einfluss auf die Expression des proapoptotischen Gegenspielers von Mcl-1, das Protein Mcl-1 S. Ein Knock-down von ARC führte zu einer verminderten Expression von Mcl-1 S in Rhabdomyosarkomzellen. Der extrinsische Apoptosesignalweg wurde mithilfe des rekombinanten Todesliganden SuperKillerTRAIL induziert. Bei der extrinsischen Apoptose konnte ein Synergismus zwischen ARC und TRAIL im Rhabdomyosarkom beobachtet werden. Durch einen Knock-down von ARC konnte die TRAIL-Resistenz von TE-671-Zellen aufgehoben werden. Der Effekt von TRAIL auf die Rhabdomyosarkomzellen wurde dabei wahrscheinlich über den Todesrezeptor DR5 vermittelt. Der extrinsische Apoptosesignalweg könnte einen wichtigen Mechanismus für die überlebensfördernde Rolle von ARC im Rhabdomyosarkom darstellen. Rhabdomyosarcoma is the most common type of soft tissue malignancy in children. Advanced cancer stages are poorly susceptible to conventional radio- and chemotherapy. To improve the prognosis of affected patients, it is crucial to develop targeted tumor therapies. It is known that the balance between pro- and antiapoptotic molecules in cells of numerous tumor entities is disturbed towards antiapoptotic signals. In this way, tumor cells can evade the natural cell death, apoptosis, and develop cancer drug resistances. In our previous work we found a great overexpression of an important member of antiapoptotic proteins in embryonal rhabdomyosarcoma - the protein ARC. In this study we investigated the role of ARC in intrinsic and extrinsic apoptosis after downregulating its expression in the embryonal rhabdomyosarcoma cell line TE-671. After knockdown of ARC TE-671 cells were treated with ABT-263, an inhibitor of the antiapoptotic proteins Bcl-2, Bcl-xL and Bcl-w. ABT-263 induced intrinsic and to a small amount extrinsic apoptosis in TE-671 cells. ARC localized to the nucleus and cytoplasm of rhabdomyosarcoma cells. There was no significant impact of ARC on the intrinsic apoptosis pathway in rhabdomyosarcoma. ARC knockdown could not reduce the resistance of TE-671 cells towards ABT-263. A possible reason could be the overexpression of Mcl-1 and its lack of regulation by ARC in rhabdomyosarcoma. Interestingly, ARC had a stimulating effect on the expression of the protein Mcl-1 S, the proapoptotic counterpart of Mcl-1. Knockdown of ARC reduced the expression of Mcl-1 S in rhabdomyosarcoma. Extrinsic apoptosis was induced by the recombinant death ligand SuperKillerTRAIL. A synergistic effect in rhabdomyosarcoma was observed between ARC and TRAIL in extrinsic apoptosis pathway. Knockdown of ARC decreased the resistance of TE-671 cells towards TRAIL. The effect of TRAIL in rhabdomyosarcoma cells was most likely mediated through the death receptor DR5. The extrinsic apoptosis pathway could be an important mechanism of the prosurvival role of ARC in rhabdomyosarcoma.
Lizenz:	Dieses Werk ist lizenziert unter einer Creative Commons Namensnennung 4.0 International Lizenz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	26.07.2023
Dateien geändert am:	26.07.2023
Promotionsantrag am:	20.02.2023
Datum der Promotion:	27.06.2023