Dokument: Analyse putativer Interleukin-23 Rezeptor interagierender Proteine
| Titel: | Analyse putativer Interleukin-23 Rezeptor interagierender Proteine | |||||||
| Weiterer Titel: | Analysis of putative Interleukin-23 Receptor interacting Proteins | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=60622 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20220926-093343-9 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Thives-Kurenbach, Felix [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. rer. nat. Scheller, Jürgen [Gutachter] PD Dr. rer. nat. Stork, Björn [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Zusammenfassung
Zytokine sind kleine Peptide, die der interzellulären Kommunikation im Rahmen der Immunabwehr dienen. Das Zytokin Interleukin-23 (IL-23) besteht aus den Untereinheiten p19 und p40 und ist über die Aktivierung und Stabilisierung des pathologischen T-Helfer Subtypen 17 (TH17) mit zahlreichen Autoimmunerkrankungen assoziiert, darunter die Multiple Sklerose, die Colitis Ulcerosa und die Psoriasis vulgaris. Der IL-23 Rezeptorkomplex, bestehend aus dem Interleukin-23 Rezeptor (IL-23R) und dem Interleukin-12 Rezeptor ß1 (IL-12Rß1), aktiviert nach IL-23-Bindung intrazellulare Signalwege, insbesondere den JAK/STAT-Weg. Dabei phosphorylieren transaktivierte Janus-Kinasen (JAKs) intrazelluläre Tyrosinreste des IL-23R, welche als Interaktionsstellen für signal transducer and activator of transcription (STAT)-Proteine dienen. Aktivierte STATs dimerisieren, translozieren in den Zellkern und induzieren dort die Produktion IL-23-responsiver Proteine, darunter das suppressor of cytokine signaling 3 (SOCS3). SOCS3 bindet den signaltransduzierenden IL-6 Rezeptor Glykoprotein 130 (gp130) und fungiert so als STAT-suppressives feedback Molekül. Auch IL-23 induziert einen SOCS3-Anstieg, jedoch wurden weder eine SOCS3-Bindestelle, noch direkte STAT-suppressive Eigenschaften am IL-23R beschrieben. In der vorliegenden Arbeit wurden Fusionsproteine aus dem IL-23R und gp130 erstellt und dadurch ein funktionaler SOCS3-Schalter am IL-23R in stabil-transfizierten Ba/F3- gp130-Zellen etabliert. Außerdem wurde gezeigt, dass die C-terminale Addition des rotfluoreszierenden Moleküls mCherry keinen Einfluss auf die IL-23-Wirkung hat und ein so live cell imaging des Rezeptors ermöglicht. Weiterhin wurde gezeigt, dass eine Deletionsvariante des humanen IL-23R ohne STAT3-Bindemotive wider Erwarten keine STAT3-unabhängige Proliferation vermittelt. Im letzten Teil dieser Arbeit wurde die Interaktion zwischen dem human calcium and integrin binding protein 2 (hCIB2) sowie dem IL-23R nachgewiesen und darüber hinaus die Interaktionsstelle näher charakterisiert. Die vorliegende Arbeit gibt dadurch neue Einblicke in die Funktionsweise IL-23R abhängiger Signalwege.Summary Cytokines are small-sized peptides that serve the intercellular communication as part of immune defense. Interleukin-23 (IL-23) consists of the subunits p19 and p40 and is due to its role in activation and stabilization of the pathologic T helper cell type 17 (TH17) associated with numerous autoimmune diseases, including Multiple sclerosis, Ulcerative colitis and Psoriasis vulgaris. Upon IL-23 binding, the IL-23 receptor complex, consisting of the Interleukin-23 receptor (IL-23R) and the Interleukin-12 receptor ß 1 (IL-12Rß1), activates intracellular signaling pathways, notably the JAK/STAT pathway. Therefore transactivated Janus kinases (JAKs) phosphorylate intracellular tyrosine residues, that serve as docking site for signal transducer and activator of transcription (STAT) proteins. Activated STATs dimerize, translocate into the nucleus and there induce production of IL-23 responsive proteins, including the suppressor of cytokine signaling 3 (SOCS3). SOCS3, known to bind the signal transducing IL-6 receptor glykoprotein- 130 (gp130), acts as a STAT suppressive feedback molecule. IL-23 likewise induces a SOCS3 increase, however no SOCS3 binding site nor direct STAT suppressive properties of IL-23R has been described. Within the present work, fusion proteins of the IL-23R and gp130 were constructed and thereby a functional SOCS3 switch in stable transduced Ba/F3-gp130 cells established. Furthermore it was shown, that a C-terminal addition of the red fluorescent molecule mCherry has no influence on the IL-23 effect, thereby enabling live cell imaging of the receptor. Furthermore it was shown, that a deletion variant of the human IL-23R without STAT3 binding motifs does not mediate STAT3 independent proliferation. Within the last part of this work the interaction of the human calcium and integrin binding protein 2 (hCIB2) and the IL-23R was presented and further characterized. Thereby the present work gives new insights into the functionality of IL-23 dependent signaling pathways. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät » Institute » Institut für Biochemie und Molekularbiologie II | |||||||
| Dokument erstellt am: | 26.09.2022 | |||||||
| Dateien geändert am: | 26.09.2022 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 13.02.2022 | |||||||
| Datum der Promotion: | 06.09.2022 |
