Dokument: Einfluss des TRPA1-Kanals auf die B-Zell-Funktion
| Titel: | Einfluss des TRPA1-Kanals auf die B-Zell-Funktion | |||||||
| Weiterer Titel: | Influence of the TRPA1 channel on B cell function | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=59900 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20220628-083100-9 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Laaser, Sofia Anna Katharina [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. med. Pongratz, Georg [Gutachter] Prof. Dr. rer. nat. Neubauer, Hans [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Studien an Fibroblasten zeigten die Reduktion pro-inflammatorischer Zytokine, den ver-stärkten Übergang in den Zelltod sowie die Aufnahme von PoPo3 nach Stimulation mit TRPA1-Liganden. Neben Fibroblasten sind B-Zellen in der Pathogenese der rheumatoiden Arthritis wichtig. Deshalb sollte der Einfluss des TRPA1-Kanals auf die Zytokin-Produktion, das Leben-/Todverhalten, das intraz. Calcium sowie die Aufnahme des Farbstoffs PoPo3 auf B-Zellen mit Hilfe bekannter Liganden des Kanals untersucht werden, um spezifische Zielstrukturen für einen pharmakologischen Nutzen zu eruieren.
TRPA1 und eine mögliche Hochregulation nach CpG/anti-IgM-Stimulation in B-Zellen wurde mittels Western-Blot nachgewiesen. TNF-alpha- und IL-10-Produktion wurde mit einem ELISA untersucht. Die Leben-/Todmessung erfolgte mit einer Annexin V/PI-Fär-bung. Die Calcium-Messung sowie die PoPo3-Aufnahme wurden mit einem Multimode-Reader durchgeführt. Der TRPA1- und TRPV2-Kanal wurden in murinen CD19-pos. B-Zellen nachgewiesen, der TRPA1-Kanal zudem in humanen B-Zellen. Eine Hochregulation nach Stimulation mit CpG/anti-IgM erfolgte nicht. Nach Stimulation der B-Zellen mit den TRPA1-Ago-nisten CBD und CIN wurden bei CpG/anti-IgM stim. B-Zellen weniger TNF-alpha und IL-10 gemessen. Polygodial nahm keinen Einfluss auf die Zytokinproduktion. Durch Sti-mulation mit CBD und CIN erfolgte ein vermehrter Übergang der B-Zellen in die Apoptose nicht jedoch in die Nekrose. Bei Polygodial veränderte sich das Leben-/Tod-verhalten nicht. Das intraz. Calcium stieg konzentrationsabhängig bei Stimulation der B-Zellen mit CBD, CIN und Polygodial, auch bei Abwesenheit von extraz. Calcium. Der Farbstoff PoPo3 wurde nach Stimulation mit CBD und CIN aus der B-Zelle ausgeschleust und nach Stimulation mit Polygodial in die B-Zelle aufgenommen. Spezifische Antago-nisten gegen TRP-Kanäle konnten die Effekte von CBD, CIN und Polygodial nicht inhi-bieren. Die Reduktion pro-inflammatorischer Zytokine sowie die Sensibilisierung gegenüber Apoptose durch CBD und CIN ermöglichen einen pharmakologischen Einsatz gegen Ge-websentzündungen bei der rheumatoiden Arthritis. Die Aufnahme von PoPo3 in B-Zellen durch Stimulation mit Polygodial zeigt das Potential einer Wirkstoffaufnahme von Pharmaka direkt in die B-Zellen. Durch fehlende Antagonisierung der Stimulantien bleibt die Zielstruktur noch zu untersuchen.Studies on fibroblasts showed the reduction of pro-inflammatory cytokines, the enhanced transition to cell death and the uptake of PoPo3 after stimulation with TRPA1 ligands. Besides fibroblasts, B cells are important in the pathogenesis of rheumatoid arthritis. Therefore, the influence of the TRPA1 channel on cytokine production, life/death behavior, intracellular Calcium as well as the uptake of the dye PoPo3 on B cells using known ligands of the channel should be investigated to identify specific targets for pharmacological benefit. TRPA1 and a possible upregulation after CpG/anti-IgM stimulation in B cells was de-tected by Western blotting. TNF-alpha and IL-10 production was investigated by ELISA. The live/death measurement was performed with an Annexin V/PI stain. The calcium measurement as well as PoPo3 recording was performed with a multimode reader. The TRPA1 and TRPV2 channels were measured in murine CD19-positive B cells. The TRPA1 channel was also detected in human B cells. An upregulation after stimulation with CpG/anti-IgM was not observed. After stimulation of the B cells with the TRPA1 agonists CBD and CIN, less TNF-alpha and IL-10 was observed on CpG/anti-IgM stim-ulated B cells. Polygodial did not influence cytokine production. Stimulation with CBD and CIN resulted in an increase transition of B cells into apoptosis but not into necrosis. Polygodial did not change the life/death behavior. The intracellular Calcium increased in a concentration-dependent manner when B cells were stimulated with CBD, CIN and Polygodial, even in the absence of extracellular calcium. The dye PoPo3 was removed from the B cell after stimulation with CBD and CIN and absorbed into the B cells after stimulation with Polygodial. Specific antagonists to TRP channels were unable to inhibit the effects of CBD, CIN and Polygodial. The reduction of pro-inflammatory cytokines as well as the sensitization to apoptosis by CBD and CIN allow a pharmacological use against tissue inflammation in rheumatoid arthritis. The uptake of PoPo3 in B cells by stimulation with Polygodial shows the potential of drug uptake directly into the B cells. Due to the lack of antagonization of the stimulants, the target structure remains to be investigated. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät | |||||||
| Dokument erstellt am: | 28.06.2022 | |||||||
| Dateien geändert am: | 28.06.2022 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 04.12.2021 | |||||||
| Datum der Promotion: | 31.05.2022 |
