Dokument: Der Einfluss von Griseofulvin auf die Biosynthese adrenokortikaler Hormone und die Anordnung zentrosomaler Strukturelemente in humanen Nebennierenrindenzellen
| Titel: | Der Einfluss von Griseofulvin auf die Biosynthese adrenokortikaler Hormone und die Anordnung zentrosomaler Strukturelemente in humanen Nebennierenrindenzellen | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=55654 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20210309-112746-1 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Bokredenghel, Senai [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | PD Dr. med. Stegbauer, Johannes [Gutachter] Prof. Dr, med Schott, Matthias [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Das antifungale Medikament Griseofulvin interferiert mit der Anordnung der Mikrotubuli in menschlichen Zellen. Indirekt könnte Griseofulvin damit auch die Steroidbiosynthese und die intrazelluläre Verteilung von Zentrosomen beeinflussen, da deren Regulation mit dem Mikrotubulusapparat eng verknüpft ist.
Das Ziel der Arbeit ist die Untersuchung der Effekte von Griseofulvin auf die Biosynthese adrenokortikaler Hormone sowie auf die Anordnung zentrosomaler Strukturelemente in humanen Nebennierenrindenzellen. Für die in vitro Untersuchungen wurde die adrenokortikale Tumorzelllinie NCI-H295R kultiviert und für jeweils 24h mit DMSO allein oder mit Griseofulvin in Konzentrationen zwischen 1µM und 100 µM für 24 Stunden inkubiert. Die Konzentrationen von Dehydroepiandrosteron (DHEA), Aldosteron und Cortisol im Überstand wurden daraufhin mittels eines „Enzyme- linked Immunosorbent-Assay“ (ELISA) bestimmt. Anschließend erfolgte eine Immunfluoreszenz-Färbung der NCI-H295R Zellen zur Analyse der intrazellulären Verteilung von steroidogenic factor 1 (SF-1) und γ-Tubulin. Die Verteilung der γ-Tubulin-Expression wurde mittels Immunhistochemie in unterschiedlichen in Paraffin-eingebettetem Tumorgeweben (n= 25) untersucht. Die Exposition mit Griseofulvin führte in NCI-H295R Zellen zu einem signifikanten dosisabhängigen Anstieg der Aldosteron- (5-fach, p ≤ 0,05) und der DHEA-Konzentration (3-fach, p ≤ 0,046). Die Inkubation mit Griseofulvin bewirkte eine Fragmentierung der zytoplasmatischen Verteilung von γ-Tubulin und eine Akkumulation von SF-1 in umschriebenen Strukturen der perinukleären Region, gefolgt von einer nukleären Translokation bei höheren Dosierungen. Griseofulvin beeinflusst die Steroidbiosynthese, begleitet von einer subzellulären veränderten Verteilung von γ-Tubulin und SF-1. Die Expression von γ -Tubulin scheint sich in verschiedenen Tumorentitäten zu unterscheiden.The antifungal drug griseofulvin interferes with the arrangement of microtubules in human cells. Indirectly, griseofulvin could also influence steroid biosynthesis and the intracellular distribution of centrosomes since their regulation is closely linked to the microtubule apparatus. The aim of the work is to investigate the effects of griseofulvin on the biosynthesis of adrenocortical hormones and on the arrangement of centrosomal structural elements in human adrenocortical cells. For the in vitro studies, the adrenocortical tumor cell line NCI-H295R was cultivated and incubated for 24 hours with DMSO alone or with griseofulvin in concentrations between 1µM and 100 µM for 24 hours. The concentrations of dehydroepiandrosterone (DHEA), aldosterone and cortisol in the supernatant were then determined using an “enzyme-linked immunosorbent assay” (ELISA). This was followed by immunofluorescence staining of the NCI-H295R cells to analyze the intracellular distribution of steroidogenic factor 1 (SF-1) and γ-tubulin. The distribution of γ -tubulin expression was examined by immunohistochemistry in different tumor tissues embedded in paraffin (n = 25). Exposure to griseofulvin resulted in a significant dose-dependent increase in aldosterone (5-fold, p ≤ 0.05) and DHEA concentration (3-fold, p ≤ 0.046) in NCI-H295R cells. Incubation of the cell line with griseofulvin caused fragmentation of the cytoplasmic distribution of γ-tubulin and accumulation of SF-1 in circumscribed structures of the perinuclear region, followed by nuclear translocation at higher doses. Griseofulvin influences steroid biosynthesis, accompanied by a subcellular altered distribution of γ-tubulin and SF-1. The expression of γ -tubulin appears to differ in different tumor entities. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät | |||||||
| Dokument erstellt am: | 09.03.2021 | |||||||
| Dateien geändert am: | 09.03.2021 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 19.08.2020 | |||||||
| Datum der Promotion: | 04.03.2021 |
