Dokument: Stromale Beeinflussung der Strahlensensitivität des Ösophaguskarzinoms

Titel:	Stromale Beeinflussung der Strahlensensitivität des Ösophaguskarzinoms
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=54114
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20200907-113115-5
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Morawitz, Janna [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 2,15 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 03.09.2020 / geändert 03.09.2020
Beitragende:	Prof. Dr. Fischer, Jens W. [Gutachter] Prof. Dr. Gödecke, Axel [Gutachter]
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibungen:	Mit über 6500 Neuerkrankungen pro Jahr ist das Ösophaguskarzinom die achthäufigste Krebserkrankung in Deutschland. Die 5-Jahres-Überlebensrate von knapp 25 % zeigt die ungünstige Prognose dieser Erkrankung. In vielen Fällen bildet die Bestrahlung eine wesentliche Säule der Therapie. Aus Forschungsarbeiten der letzten Jahre ergeben sich Hinweise darauf, dass das Tumorstroma eine entscheidende Rolle bei der Reaktion eines Tumors auf ionisierende Strahlung spielt. Vorausgegangene Arbeiten der eigenen Arbeitsgruppe haben gezeigt, dass bestrahlte Fibroblasten zellkontaktabhängig die Tumorapoptoserate bei Ösophaguskarzinomzellen signifikant erhöhen (1). Die Hypothese, dass von bestrahlten Fibroblasten transferierte Proteine verantwortlich für diesen Effekt sind, konnte in dieser Arbeit durch einen neuartigen Trans-SILAC- Versuchsansatz belegt werden. Nach der Markierung der Fibroblasten mit Isotopen-haltigen Aminosäuren wurden die Fibroblasten mit Ösophaguskarzinomzellen kokultiviert, um den Transfer der Proteine zu ermöglichen. Nach einer durchflusszytometrischen Trennung der beiden Zelllinien konnte das Proteom der Ösophaguskarzinomzellen massen- spektrometrisch auf enthaltene Isotopen-haltige (und somit aus Fibroblasten stammende) Proteine untersucht werden. Die Analysen ergaben drei Proteine, die signifikant von bestrahlten Fibroblasten in Ösophaguskarzinomzellen geschleust werden. Durch Knockdown-Versuche, Echtzeit-Mikroskopie sowie SubG1-Zellzyklusanalysen konnte gezeigt werden, dass eines dieser Proteine - SHANK1 – grundlegend an der Vermittlung des erhöhten Tumorzelltodes beteiligt ist. In weiteren Kokulturversuchen konnte belegt werden, dass auch die Apoptoserate weiterer Tumorzelllinien durch bestrahlte Fibroblasten signifikant erhöht werden kann. Mechanismen, die darauf abzielen die Tumorzellen für ionisierende Strahlung zu sensitivieren, stellen somit einen potentiellen Ansatzpunkt für zukünftige Therapiestrategien des Ösophaguskarzinoms dar. With more than 6500 new cases each year esophageal carcinoma is the eighth common cancer in Germany. The 5-year-survival-rate is about 25 % and shows this disease’ unfavorable prognosis. In many cases, radiation is one of the essential parts of therapy. Research studies in recent years showed, that especially the tumor microenvironment is an important determinant of radiation response. Previous results from this working group have shown that in case of esophageal carcinoma fibroblasts enhance tumor cell-apoptosis in a cell-contact dependent manner (1). The hypothesis that the shuttling of proteins from irradiated fibroblasts to esophageal cancer cells is responsible for this effect could be confirmed in this study by a novel Trans-SILAC approach. In cell culture, the fibroblasts proteome was labelled with amino acids containing heavy isotopes. Afterwards, labelled fibroblasts were cocultured with esophageal carcinoma cells, followed by cell- sorting via flow cytometric analysis. The esophageal carcinoma proteome was analyzed by mass spectrometry, to evaluate isotope-containing (and thus from fibroblasts originating) proteins. The results of this analysis show that three proteins were significantly shuttled from irradiated fibroblasts to esophageal carcinoma cells. By the use of knock- down experiments, time-lapse microscopy as well as SubG1-cell cycle analysis, it could be proven that one of these three shuttled proteins - SHANK1 - is essentially involved in the process of increased tumor apoptosis. Further co- culture experiments show that also other tumor cell lines show an increased rate of apoptosis when cocultured with irradiated fibroblasts. Mechanisms aiming at sensitizing tumor cells towards ionizing radiation could be a potential approach for future therapy strategies of esophageal carcinoma.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät » Institute » Institut für Pharmakologie und Klinische Pharmakologie
Dokument erstellt am:	07.09.2020
Dateien geändert am:	07.09.2020
Promotionsantrag am:	11.06.2019
Datum der Promotion:	27.08.2020