Dokument: Die Rolle des Myelinproteins 2 (P2) bei der Myelinbildung im peripheren Nervensystem

Titel:	Die Rolle des Myelinproteins 2 (P2) bei der Myelinbildung im peripheren Nervensystem
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=48557
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20190214-094302-7
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Klingler, Fabian [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 4,69 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 13.02.2019 / geändert 13.02.2019
Beitragende:	Prof. Dr. Kieseier, Bernd C. [Gutachter] Prof. Dr. Weggen, Sascha [Gutachter]
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibungen:	In dieser Arbeit wurde die Rolle des Myelinproteins 2 (P2) auf die Myelinbildung im peripheren Nervensystem untersucht. P2 ist ein seit längerem bekanntes Myelinprotein, detektierbar in der peripheren Myelinscheide spezifischer Fasern. Neuste Ergebnisse lassen vermuten, dass P2 neben seiner Funktion als Membranprotein auch als Lipidtransporter Einfluss auf die Zusammensetzung des Myelins nehmen kann. Die dezidierte Rolle von P2 beim Prozess der Myelinbildung und Myelinregeneration ist weitgehend ungeklärt. Basierend auf dem Vergleich der P2-defizienten Mauslinie mit Wildtyp-Kontrolltieren, wurde in dieser Arbeit in vivo die funktionelle Bedeutung von P2 nach experimentellem Nervenschaden durch elektrophysiologische und morphometrische Untersuchungen im Nervenschnitt beleuchtet. Durch die Verwendung des myelinisierenden Hinterstrangganglienmodels wurden in vitro Erkenntnisse über P2 bei der initialen Myelinisierung und Remyelinisierung gewonnen. Es kamen Färbemethoden mit fluoreszierenden Fettsäuren, Sudanschwarz und Immunzytochemie zur Anwendung und die Kulturen wurden mikroskopisch untersucht. Mittels Real-Time-Quantitative Polymerase-Kettenreaktion wurde die RNA-Expression quantifiziert und durch die Technik der Zymographie die Aktivität der Matrix-Metalloproteasen im Kulturmedium beurteilt. Morphologie und Myelinmenge der P2-defizienten Kulturen zeigten keinen signifikanten Unterschied zu den Kontrollen. Internodal- und Nodallänge ergaben für P2-defiziente Kulturen verbreiterte Ranvier'sche Schnürringe, insbesondere nach experimenteller ex vivo Demyelinisierung. Immunzytochemisch konnte gezeigt werden, dass P2 auch in Fasern vorkommt, die sich für Myelin-Basisches Protein negativ zeigten. In vivo zeigten die P2-defizienten Mäuse verstärkt klinische Einschränkungen nach experimentellem Nervenschaden, die Messung der Nervenleitgeschwindigkeit der Versuchstiere zeigte für P2-defiziente Mäuse eine signifikant verlangsamte Nervenleitgeschwindigkeit 14 Tage nach der Nervenläsion. Die Analyse der Enzymaktivität wies auf eine abweichende Aktivität der Matrix-Metalloproteasen hin. Diese Ergebnisse schreiben P2 eine besondere Bedeutung im Rahmen von Regenerations- und Remyelinisierungsvorgängen nach Nervenschädigungen im PNS zu. This study examined the role of Myelin Protein 2 (P2) on Myelin production in the peripheral nervous system. P2 is known as a myelin protein detectable in the peripheral myelin sheath of specific fibres. Additional to its structural role as membrane protein, recent studies indicate P2 to be involved in the lipid homeostasis in the peripheral neural system. However its precise role during myelin production and regeneration has yet to be elucidated. Based on a comparison of P2-deficient mice with corresponding wild-type animals we assessed in vivo the functional importance of P2 after experimental nerve crush injury using elctrophysiology and morphometric measurment of semithin sections. Using a myelinating culture model with dorsal root ganglia the role of P2 in initial myelination and remyelination in vitro was examined. The cultures underwent immunocytochemistry, sudan black staining and fluorescent acid staining and were assessed with an upright microscope. RNA-Expression was quantified using Real-Time Polymerase Chain Reaction and using Zymography the activity of Matrix Metalloproteinases in the culture medium was evaluated. Morphology and total amount of Myelin in P2-deficient cultures showed no significant alteration compared to the control group. Measurement of internodal and nodal length showed whider Nodes of Ranvier in P2-deficient cultures particularly after experimental demyelination. Immunocytochemistry proved the presence of P2 in fibres without Myelin Basic Protein. In vivo experiments showed increased clinical impairment in P2-deficient mice after experimental nerve crush and electrophysiology resulted in decreased nerve conduction velocity in P2-decficient mice 14 days after nerve crush. Analysation of enzyme activity showed no significant alteration in Matrix Metalloproteinase activity. These data indicate that P2 may play a role in nerval regeneration and remyelination in the injured peripheral nervous system, presumably by affecting the nodal and internodal configuration.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	14.02.2019
Dateien geändert am:	14.02.2019
Promotionsantrag am:	22.11.2017
Datum der Promotion:	12.02.2019