Dokument: Untersuchung der Rolle von Leukemia Inhibitory Factor in der Therapie der renalen Inflammation und Fibrose im unilateralen Ureterobstruktionsmodell
| Titel: | Untersuchung der Rolle von Leukemia Inhibitory Factor in der Therapie der renalen Inflammation und Fibrose im unilateralen Ureterobstruktionsmodell | |||||||
| Weiterer Titel: | Investigation of the role of Leukemia Inhibitory Factor in the treatment of renal inflammation and fibrosis in the unilateral ureterobstruction model | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=46500 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20180717-101805-5 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Srugies, Fabian [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | PD Dr. med. Quack, Ivo [Gutachter] Prof. Dr. med. Giessing, Markus [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Die tubulointerstitielle Fibrose ist ein häufiges morphologisches Korrelat einer chronischen Nierenerkrankung (Chronic Kidney Disease (CKD)). Chronische Inflammation ist der entscheidende Stimulus für den progredienten fibrotischen Umbau der Niere. Für diese inflammatorischen Prozesse sowie für die renale Immunantwort spielen CD4+ T-Zellen eine entscheidende Rolle. Leukemia inhibitory factor (LIF), ein Mitglied der Interleukin 6 Familie, und Interleukin 6 (IL-6) regulieren die Balance zwischen der TH17 und regulatorischen T-Zellimmunantwort. Während LIF die Expression des Transkriptionsfaktors forkhead-box-P3 (Foxp3) und somit die Entstehung von regulatorischen T-Zellen (Tregs) induziert, führt IL-6 über die Induktion des Transkriptionsfaktors RAR-related orphan receptor gamma (RORyt) zur Entwicklung von TH-17 Zellen. Eine Dysregulation oder Überproduktion von TH17-Zellen verursacht eine renale Inflammation. In der vorliegenden Arbeit wurde der Einfluss von LIF auf die renale Inflammation und tubulointerstitielle Fibrose im unilateralen Ureterobstruktionsmodell (UUO) untersucht. Für die Experimente wurden sechs bis acht Wochen alte C57BL/6 Mäuse täglich mit LIF oder Phosphatgepufferter Salzlösung (Phosphate Buffered Saline (PBS)) intraperitoneal behandelt. Die Behandlung begann zwei Tage vor der UUO-OP. Zehn Tage nach der UUO-OP wurden die Nieren, die Milz und die paraaortalen Lymphknoten entnommen. Die Ergebnisse der qPCR Daten aus den obstruierten Nieren zeigten, dass die Inflammations- bzw. Fibrosemarker NFκB, RANTES, Collagen1a1 und TGF-β in der Behandlungsgruppe (UUO+LIF) im Vergleich mit der Kontrollgruppe (UUO) signifikant erniedrigt waren. Für IL-17a, IL-1b, IL-6, MCP1, PAI1, PDGFR1 und TNFα war kein signifikanter Unterschied nachzuweisen. Die Untersuchung der paraaortalen Lymphknoten zeigte eine signifikante Reduktion der Expression von MCP1, NFκB, RANTES und TNFα in der Behandlungsgruppe im Vergleich mit der Kontrollgruppe. Die Expression von IL-1b und IL-6 war ebenfalls erniedrigt, erreichte jedoch nicht das definierte Signifikanzniveau. Im Verlauf des UUO-Schädigungsmodells kommt es zu einer Akkumulation von CD3+T-Zellen und F4/80+Makrophagen. LIF führte zur einer signifikanten Reduktion der renalen CD3+- und F4/80+ Zellinfiltration. Zudem reduzierte die LIF Behandlung signifikant das Ausmaß der tubulointerstielllen Fibrose. Sowohl in der Sirius Red Morphometrie als auch für die Collagen1a1 Western Blot Analyse ergaben sich für die Behandlungsgruppe signifikant niedrigere Fibrosegrade, verglichen mit der Kontrollgruppe. Die LIF Behandlung führte darüber hinaus zu einem signifikanten Anstieg von antiinflammatorischen Zytokinen wie IL-10 und zu einer Abschwächung von proinflammatorischen Zytokinen wie IL-6, RANTES oder G-CSF im Plasma der Versuchstiere. Die LIF Behandlung stellt somit eine zukünftige Therapieoption dar, weil sie zu einer signifikanten Abschwächung von tubulointerstitieller Fibrose im UUO-Modell führt.Tubulointerstitial fibrosis is common cause of chronic kidney disease which is often sustained by chronic inflammation. CD4+ T-cells play an important role in immune response in kidney disease. Leukemia inhibitory factor (LIF), a member of the Interleukin 6 family, and Interleukin 6 (IL-6) play a crucial role in regulating the balance between TH17- and regulatory T-cells (Treg): LIF augments expression of forkhead-box-P3 (Foxp3) leading to Treg, IL-6 induces RAR-related orphan receptor gamma (RORyt) driving TH17 lineage development. Dysregulation or overproduction of TH17 cells result in sustained inflammation. Here, we investigate how LIF influences renal inflammation and tubulointerstitial fibrosis in unilateral ureter obstruction (UUO). 6-8-week old male C57BL/6 mice were treated intraperitoneally daily either with LIF or PBS starting 2 days prior to UUO. 10 days after UUO, kidneys, spleen and paraaortal lymphnodes were extracted. qPCR from tissue lysates of obstructed kidneys (OB) revealed that NFκB and RANTES as well as collagen1 and TGF-β were significantly downregulated in LIF treated mice. There was no significant difference between IL17a, IL-1b, IL-6, MCP1, PAI1, PDGFR1 and TNFα. Accordingly, expression of MCP1, NFκB, RANTES and TNFα in the paraaortal lymphnodes were reduced by LIF. IL-1b and IL-6 expression tended to be reduced by LIF but failed to reach statistical significance. CD3+ cells accumulated in obstructed kidneys. LIF significantly reduced renal infiltration of CD3+ cells and F4/80+ cells . LIF treatment significantly reduced tubulointerstitial fibrosis in obstructed kidneys assessed by Sirius Red morphometry and collagen1 Western Blot analysis. LIF treatment leads to a significant increase of anti-inflammatory cytokines such as IL-10 and downregulated pro-inflammatory cytokines such as IL-6, RANTES or G-CSF in plasma assessed by Luminex analysis. These data confirm the critical role of inflammation in UUO. LIF treatment significantly attenuates tubulointerstitial fibrosis by inhibiting pro-inflammatory pathways and T-cell infiltration indicating a possible future treatment option. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät | |||||||
| Dokument erstellt am: | 17.07.2018 | |||||||
| Dateien geändert am: | 17.07.2018 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 13.12.2017 | |||||||
| Datum der Promotion: | 12.07.2018 |
