Dokument: Zur Bedeutung der Thermotaxis für die gerichtete Migration humaner Spermien

Titel:	Zur Bedeutung der Thermotaxis für die gerichtete Migration humaner Spermien
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=38213
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20160428-103245-2
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Bus, Jumana [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 5,29 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 28.04.2016 / geändert 28.04.2016
Beitragende:	Prof. Dr. Homey, Bernhard [Gutachter] Prof. Dr. med. Giessing [Gutachter]
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibung:	Thermotaxis, eine gerichtete Bewegung entlang eines Temperaturgradienten, ist ein weit verbreiteter Prozess, der ubiquitär vom Bakterium bis zum Menschen konserviert ist. Mittels videomikroskopischer Analysen wurde im Rahmen dieser Arbeit die Thermotaxis humaner Spermien nachgewiesen. Spermien, die in einer modifizierten Zigmond-Kammer einem Temperaturgradienten von 34 °C bis 37 °C ausgesetzt wurden, zeigten ein gerichtetes Migrationsverhalten in Richtung des Temperaturgradienten. Es ließ sich eine signifikante Zunahme der Wanderungsstrecke der Spermien unter Einfluss des Temperaturgradienten beobachten. Zur Untersuchung der molekularen und zellulären Mechanismen dieser thermotaktischen Antwort analysierten wir die Expression von Transient Receptor Potentials (TRPs) auf humanen Spermien. Bei Eukaryonten fungieren temperaturgesteuerte Ionenkanäle der Superfamilie der TRPs als Thermosensoren. Die Analyse der Genexpression von TRP der Unterfamilie der Vanilloid-Rezeptoren (TRPV) auf humanen Spermien mittels quantitativer Real-Time-PCR zeigte die stärkste Expression von TRPV1, gefolgt von TRPV4, TRPV2 und TRPV3. Mittels Durchflusszytometrie und Immunfluoreszenzfärbungen wurde nachgewiesen, dass TRPV1, TRPV3 und TRPV4 auf Proteinebene auf Spermien exprimiert werden. Mittels immunhistochemischer Untersuchungen lokalisierten wir die Rezeptoren im Bereich des Mittelstücks und des Schwanzes der Spermien. Bei allen Probanden dominierte die Expression von TRPV1, gefolgt von TRPV4, wobei sich eine donorabhängige Variabilität in der Ausprägung der Expression der einzelnen TRPV-Subtypen aufweisen ließ. Bei der Analyse zur funktionellen Bedeutung der TRPVs für die humane Spermienthermotaxis konnten wir eine signifikante konzentrationsabhängige Abschwächung der migratorischen Antwort humaner Spermien in An- und Abwesenheit des umselektiven TRPV-Inhibitors Rutheniumrot zeigen. Zusammenfassend konnte durch die vorliegende Arbeit erstmals humane Spermienthermotaxis in einem videomikroskopischen Migrationsassay gezeigt werden. Erste Untersuchungen mit einem unselektiven TRPV-Inhibitor lassen vermuten, dass TRPV tatsächlich eine Rolle bei der Navigation von Spermien zur Eizelle und folglich für den gesamten Prozess der Befruchtung spielen könnten.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	28.04.2016
Dateien geändert am:	28.04.2016
Promotionsantrag am:	08.04.2015
Datum der Promotion:	30.03.2016