Dokument: NeTT 'New Tapasin Transcript', ein neuer endogener Inhibitor des MHC I Antigen Präsentationswegs

Titel:	NeTT 'New Tapasin Transcript', ein neuer endogener Inhibitor des MHC I Antigen Präsentationswegs
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=36587
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20151217-132234-3
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Segarra, Nele [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 2,49 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 15.12.2015 / geändert 15.12.2015
Beitragende:	Univ.-Prof. Dr. Hengel,Hartmut [Gutachter] Prof. Dr. Uhrberg, Markus [Gutachter]
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibung:	Das humane Zytomegalovirus (HCMV) hat verschiedene Strategien entwickelt, um der Elimination durch das Immunsystem zu entkommen. HCMV manipuliert auf besonders vielfältige Weise den MHC I Antigen Präsentationsweg, um so Effektorfunktionen der CD8+-T-Lymphozyten zu vermeiden. In unterschiedlichen humanen Zellen, vor allem aber in HCMV-infizierten Fibroblasten, konnte ein neu alternativ gespleißtes Tapasin (Tpn) Transkript (NeTT, TpnΔExon3) mit unbekannter Funktion detektiert werden. Ziel der vorliegenden Arbeit war es zu untersuchen, ob NeTT ein endogener Inhibitor des MHC I Antigen Präsentationswegs ist. Zunächst wurde analysiert, in wie weit NeTT ein Bestandteil des transienten Peptidbeladungskomplex (PLC) des Endoplasmatischen Retikulums ist. NeTT wurde kloniert, mittels unterschiedlicher Expressionssysteme exprimiert und als ein ca. 40 kDa großes Typ I Transmembranglykoprotein dargestellt. Während NeTT wie Tpn über den TAP-Transporter in den PLC integriert wird, kann NeTT durch das Fehlen von Exon 3 nicht mit ERp57 ein NeTT-ERp57-Heterodimer bilden. In Tpn-defizienten Zellen wurde eine schwache, jedoch nicht stabilisierende, Interaktion von NeTT mit den MHC I Molekülen nachgewiesen. Besonders für ein Tpn-abhängiges MHC I Allel, HLA-B*44:02, wurde ein divergentes Expressionsmuster beobachtet: In Tpn-defizienten Zellen konnte NeTT im Gegensatz zu Tpn die Oberflä-chenexpression der HLA-B*44:02 Moleküle nicht unterstützen. Bei simultaner Expression von Tpn und NeTT zeigte NeTT einen inhibierenden Effekt auf die Antigen Präsentation, auch wenn NeTT dabei nicht generell negativ agierte: In HeLa-Zellen, die transient mit NeTT und HLA-B*44:02 ko-transfiziert wurden, reduzierte NeTT, trotz endogener Tpn Expression, die Oberflächenexpression der HLA-B*44:02 Moleküle um 50%, während die Expression des Tpn-unabhängigen Allels HLA-B*44:05 unverändert blieb. NeTT und Tpn binden gleichzeitig an denselben TAP-Komplex. Tpn verliert dadurch seine zweite Interaktionsstelle mit TAP, wodurch die Peptidbeladung eingeschränkt wird: Während auf der Tpn-Seite MHC I Moleküle mit Peptiden beladen werden, verhindert NeTT auf der anderen Seite die Peptidbeladung und inhibiert damit die erfolgreiche MHC I Antigen Präsentation Tpn-abhängiger MHC I Allele.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	17.12.2015
Dateien geändert am:	17.12.2015
Promotionsantrag am:	10.01.2014
Datum der Promotion:	26.11.2015