Dokument: In vitro Kultur von Mausembryonen beeinflusst die mRNA-Expression von il-6, Genen der Hedgehog-Familie und relevanter Gene bezüglich ROS

Titel:	In vitro Kultur von Mausembryonen beeinflusst die mRNA-Expression von il-6, Genen der Hedgehog-Familie und relevanter Gene bezüglich ROS
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=35528
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20150918-103735-2
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Pfeifer, Nadine [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 1,64 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 18.09.2015 / geändert 18.09.2015
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibung:	Die Anzahl der nach ART geborenen Kinder ist seit der Geburt von Louise Brown, dem ersten durch IVF entstandenen Menschen, exponentiell gestiegen und beträgt 1-3% der jährlichen Geburten in entwickelten Ländern (Manipalviratn et al., 2009). Das Kulturmedium für Befruchtung und Embryonalentwicklung der ersten Tage als auch der O2-Gehalt, dem der Embryo in der in vitro Kultur ausgesetzt ist, beeinflussen die Genexpression in der Präimplantationsentwicklung. Ein atmosphärischer O2-Gehalt in der in vitro Kultur verglichen mit dem physiologischen hypoxischen Milieu im weiblichen Reproduktionstrakt verändert das Gleichgewicht der ROS und ihrer antioxidativen Schutzmechanismen (Burton et al., 2002; Agarwal et al., 2005; Rinaudo et al., 2006). In der vorliegenden Arbeit wurde im Mausmodell ein Einfluss der in vitro Kultur auf die mRNA-Expression von Einzelembryonen untersucht. Die mRNA-Expression bestimmter Gene eines in vivo Kollektivs muriner Einzelblastozysten wurde mit zwei in vitro kultivierten Kollektiven muriner Einzelblastozysten verglichen. Die Präimplan¬tationsembryonen der in vitro Kollektive wurden von d0,5 bis d3,5 in zwei verschiedenen Kulturmedien (COOK® und VitrolifeTM) inkubiert, wobei das COOK® Medium ein konventionelles Medium und das VitrolifeTM ein neueres Medium, das potentiell vor ROS schützen soll, darstellt. Nach Reverser Transkription wurden die 276 β-Aktin-mRNA-positiven Mausblastozysten der drei Kollektive mittels nested-PCR auf die mRNA-Expression folgender Genen überprüft: il-6, shh, ihh, nox, gpx4, gpx1, prdx2. In den vorliegenden Untersuchungen wies die Mehrzahl der Gene (il-6, shh, ihh, gpx4, gpx1, prdx2) ein verändertes mRNA-Expressionsmuster in den im VitrolifeTM Medium kultivierten Blastozysten verglichen mit den in vivo Blastozysten auf. Obwohl die in vitro Blastozysten der COOK® Gruppe keine abweichenden shh- und ihh-mRNA-Profile verglichen mit der in vivo Gruppe exprimierten, zeigten die anderen Gene (il-6, gpx4, gpx1, prdx2) ebenfalls eine veränderte mRNA-Expression in den im COOK® Medium kultivierten Blastozysten. Nur die nox-mRNA-Expression der in vitro Blastozysten ähnelte der der in vivo Blastozysten in beiden in vitro Kollektiven. Eine mögliche Beeinträchtigung des murinen Embryos hinsichtlich einer Schädigung durch das mit Antioxidantien ergänzte Medium kann in Erwägung gezogen werden, da die Genexpression im VitrolifeTM Kollektiv in einem größeren Ausmaß von der in vivo Situation abwich als im COOK® Kollektiv. Zusammenfassend zeigen die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit, dass die in vitro Kultur die Genexpression von Einzelembryonen während der frühen murinen Embryonalentwicklung verändert. Trotz des ständigen Bemühens der Wissenschaft, die in vitro Kultursysteme zu optimieren, ist es letztlich noch nicht gelungen, die physiologischen Bedingungen des weiblichen Reproduktionstraktes zufriedenstellend zu imitieren. Ein wichtiger Aspekt bei der Optimierung der in vitro Kultursysteme stellt O2 dar. Mögliche Implikationen der in vitro Kultur bezüglich einer veränderten Programmierung der Epigenetik sollten auch im Hinblick auf klinische Aspekte wie imprinting-Defekte oder das niedrigere Geburtsgewicht der nach IVF entstandenen Kinder bedacht und untersucht werden.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	18.09.2015
Dateien geändert am:	18.09.2015
Promotionsantrag am:	30.05.2014
Datum der Promotion:	27.08.2015