Dokument: Funktionelle und molekulare Charakterisierung des Ethylenrezeptorproteins ETR1 aus A. thaliana

Titel:	Funktionelle und molekulare Charakterisierung des Ethylenrezeptorproteins ETR1 aus A. thaliana
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=3448
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20060706-001448-5
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Voet van Vormizeele, Jan Hendrik [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 4,12 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 09.02.2007 / geändert 09.02.2007
Beitragende:	Prof. Dr. Groth, Georg [Gutachter] Prof. Dr. Jaeger, Karl-Erich [Gutachter]
Stichwörter:	Ethylen,Rezeptor,Cyanid,Protein,Membran,Phosphorylierung,Histidin,Kinase,Autokinase, Regulation
Dewey Dezimal-Klassifikation:	500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie
Beschreibung:	Der molekulare Mechanismus der Ethylenwahrnehmung und der Weiterleitung des Phytohormonsignals in Pflanzen durch den Ethylenrezeptor ETR1 ist weitgehend unklar. Für das Verständnis der Signalübertragung und der Steuerung der durch Ethylen ausgelösten Antworten spielt dessen Klärung aber eine zentrale Rolle. Statt mit indirekten, genetischen Methoden lässt sich die Frage nach dem Mechanismus nur durch direkte Untersuchungen der Funktion und der Struktur am isolierten, vollständigen Protein beantworten. Zur Klärung dieser Fragestellung wurden in der vorliegenden Arbeit verschiedene Reinigungsstrategien entwickelt, um ETR1 in ausreichenden Mengen für strukturelle und funktionelle Untersuchungen zur Verfügung zu stellen. Mit gereinigten ETR1 Protein wurden Untersuchung zur Sekundärstruktur mittels Zirkular Dichroismus (CD) Spektroskopie durchgeführt. Erste mit dem gereinigten Rezeptorprotein ergaben bislang noch keine streufähigen Kristalle. In funktionellen Untersuchungen konnte das in vivo beschriebene ETR1 Dimer in einem in vitro Reaktionsansatz mit gereinigtem, monomeren ETR1 Protein nachgewiesen werden. Untersuchungen zur Aktivität der Histidinkinasedomäne wiesen die Autokinaseaktivität in Abwesenheit eines Ethylenreizes des kompletten ETR1 Rezeptorproteins nach. Erstmals wurde im Rahmen dieser Doktorarbeit eine Regulation der Aktivität durch die Ethylenagonisten und –antagonisten Cyanid und MCP belegt. Es konnte gezeigt werden, dass die Bindungsstelle von Cyanid und MCP in der Membrandomäne des ETR1 liegt und dass die Inhibierung der Aktivität mit Cyanid durch die Verdrängung von MCP aus der Bindungsstelle verhindert werden kann. Neben der beschriebenen und primär beobachteten Phosphorylierung des Histidins in Position 353 konnte die Phosphorylierung weiterer Aminosäurereste belegt werden. Anhand eines Strukturmodells des löslichen Bereichs des ETR1 Rezeptor-proteins wurden mögliche alternative Phosphorylierungsziele ermittelt.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie
Dokument erstellt am:	06.07.2006
Dateien geändert am:	12.02.2007
Promotionsantrag am:	30.06.2006
Datum der Promotion:	30.06.2006