Dokument: Die Rolle der Apoptose-relevanten Faktoren Daxx und DAP-Kinase im h umanen Nierenzellkarzinom

Titel:	Die Rolle der Apoptose-relevanten Faktoren Daxx und DAP-Kinase im h umanen Nierenzellkarzinom
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=3434
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20060629-001434-7
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Wethkamp, Nils [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 6,96 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 15.02.2007 / geändert 15.02.2007
Beitragende:	Prof. Dr. Gerharz, Claus Dieter [Gutachter] Prof. Dr. Kunz, Werner [Gutachter] Prof. Dr. Ernst, Joachim F. [Gutachter]
Stichwörter:	Apoptose, Daxx, DAP-Kinase, Nierenzellkarzinom, p53
Dewey Dezimal-Klassifikation:	500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie
Beschreibung:	Apoptose ist ein elementarer Prozess in der Entwicklung und Differenzierung von mehrzelligen (tierischen) Organismen, durch den Zellen sterben, die ihre Funktion verloren haben oder eine potentielle Gefahr für den Gesamtorganismus darstellen. Eine Fehlregulation dieses Prozesses ist eine der Hauptursachen für die Entstehung von Tumoren. Das physiologische Verhältnis zwischen pro- und anti-apoptotischen Faktoren ist hierbei oftmals gestört, indem vermehrt Apoptose-inhibierende Faktoren gebildet werden oder pro-apoptotische Faktoren funktionell inaktiviert sind. Daxx und DAP-Kinase sind pro-apoptotische Faktoren und wurden im Rahmen der vorliegenden Arbeit hinsichtlich einer potentiellen Beteiligung innerhalb der Apoptose-Dysregulation des humanen Nierenzellkarzinoms (RCC, renal cell carcinoma) untersucht. Die initiale Fragestellung war, ob im RCC eine funktionelle Inaktivierung dieser Faktoren vorliegt, die möglicherweise zur Tumorgenese sowie der ausgeprägten Apoptose- und Therapieresistenz dieses Tumors beitragen könnte. Es konnte gezeigt werden, dass das RCC eine weitgehende Aufrechterhaltung der DAP-Kinase-Expression aufweist, wodurch es sich von den meisten anderen bisher untersuchten Tumortypen unterscheidet. Darüber hinaus waren keine signifikanten Unterschiede hinsichtlich der DAP-Kinase-Expression in unterschiedlichen Tumorstadien sowie verschiedenen histologischen Subtypen des RCC detektierbar. In weiterführenden Untersuchungen an diversen RCC-Zelllinien konnte gezeigt werden, dass DAP-Kinase zwar exprimiert wird, das Protein aber enzymatisch weitgehend inaktiv vorliegt, so dass die Ergebnisse insgesamt auf eine post-translationelle Inaktivierung der DAP-Kinase im RCC schließen lassen. Die Analyse der Daxx-Expression lieferte ebenfalls keine Hinweise, die auf eine Inaktivierung auf Ebene der Expression schließen lassen. Im Rahmen dieser Untersuchungen konnten zwei neue Spleißvarianten von Daxx identifiziert werden, so dass eine mögliche Inaktivierung des Daxx-Gens durch den Mechanismus des alternativen Spleißens untersucht wurde. Die Charakterisierung der Spleißvarianten Daxx-β und Daxx-γ zeigte, dass sich diese in verschiedenen Aspekten von der Hauptform Daxx-α unterscheiden: So besitzen beide einen veränderten C-Terminus, was zu einer Modifikation des Proteinbereichs führt, der für die Interaktion von Daxx mit verschiedenen Faktoren wie PML, CD95 und p53 verantwortlich ist. Wie gezeigt werden konnte besitzen Daxx-β und Daxx-γ eine deutlich geringere Affinität gegenüber PML, was sich auf ihre subzelluläre Lokalisation auswirkt. Während Daxx-α von PML in die so genannten PODs rekrutiert wird, sind Daxx-β und Daxx-γ zwar ebenfalls im Kern lokalisiert, akkumulieren hier aber vorwiegend in alternativen Strukturen. Darüber hinaus weisen Daxx-β und Daxx-γ im Vergleich zu Daxx-α eine stark reduzierte Affinität zu p53 auf und sind nicht in der Lage, die p53-abhängige Transkription zu reprimieren. Vor dem Hintergrund, dass Daxx-α über die transkriptionelle Repression von p53 die p53-abhängige Apoptose indirekt fördert, wurde untersucht, ob das alternative Spleißen von Daxx zur Bildung von Daxx-β und Daxx-γ im humanen RCC einen Resistenz-Mechanismus gegenüber der p53-abhängigen Apoptose darstellen könnte. Es zeigte sich jedoch, dass die p53-induzierte Transkription und Apoptose im RCC unabhängig von Daxx verläuft. Weitere Untersuchungen lieferten ebenfalls keinen Hinweis auf eine Beteiligung von Daxx an der CD95-abhängigen Apoptose. Stattdessen konnte gezeigt werden, dass die Überexpression der Daxx-Varianten einen zytoprotektiven Effekt gegenüber der Behandlung mit dem Zytostatikum Taxol vermittelt, wobei die Resistenzniveaus nach Daxx-α-, Daxx-β- bzw. Daxx-γ-Überexpression vergleichbar waren. Insgesamt sprechen die Daten der vorliegenden Arbeit gegen eine pro-apoptotische Funktion von Daxx im humanen Nierenzellkarzinom, so dass im Hinblick auf die zu untersuchende Fragestellung eine Inaktivierung dieses Faktors vermutlich nicht essentiell für die Tumorgenese des RCC zu sein scheint. Das alternative Spleißen von Daxx stellt demzufolge vermutlich keinen Inaktivierungsmechanismus dar, sondern dient womöglich der Feinregulation von Daxx im RCC.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie
Dokument erstellt am:	29.06.2006
Dateien geändert am:	15.02.2007
Promotionsantrag am:	23.06.2006
Datum der Promotion:	23.06.2006