Dokument: Interaktionen und Komplex-Bildungen von Rezeptor-Kinasen
| Titel: | Interaktionen und Komplex-Bildungen von Rezeptor-Kinasen | |||||||
| Weiterer Titel: | On Receptor Kinase Interactions and Complex Formations | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=33992 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20150402-094614-4 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Englisch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Somssich, Marc [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Simon, Rüdiger [Gutachter] Prof. Dr. Groth, Georg [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibungen: | In dieser Arbeit wurde ein multiparameter Fluoreszenzabbildungsspektroskopie-Aufbau konzipiert und etabliert um Veränderungen in Proteinlokalisation und Interaktionsstatus in einzelnen lebenden Pflanzenzellen zu beobachten. Dieser Aufbau wurde dazu genutzt die Effekte von Ligandenerkennung auf die Rezeptorproteine des flagellin (flg) Signalweges, der in der pflanzlichen Schädlingsabwehr involviert ist, und des CLAVATA (CLV) Signalweges, der ein Regulator der Stammzellhomöostase ist, zu beobachten. Außerdem wurde eine Funktionsanalyse des Proteins CORYNE (CRN) vorgenommen, um den einzelnen Domänen dieser potenziellen Pseudokinase Funktionen zuzuschreiben. Zudem wurde eine Untersuchung zu den Effekten verschiedener Linker für Fluoreszierende Proteine in Pflanzen vorgenommen um einen Linker zu finden, der sowohl hohe Förster-Resonanzenergietransfer (FRET)-Effizienzen sowie die korrekte Faltung und Reifung der Proteine erlaubt. Schließlich wurde die konventionelle zwei-Protein FRET-Akzeptor Fotozerstörung (APB) Technik in eine zwei-FRET-Paar drei-Fluorophor Technik weiterentwickelt, wodurch es möglich wird trimäre Proteinkomplexe zu detektieren oder eine Protein-Protein Interaktionsmessung mitsamt der dazugehörigen Positiv- (oder Negativ-) Kontrolle in derselben Zelle zu messen.In this study a multi-parameter fluorescent imaging spectroscopy (MFIS) setup was designed and established to facilitate the monitoring of changes in protein localizations and interaction states over time in single living plant cells. This setup was used to monitor the effects of ligand perception on the receptor proteins of the flagellin (flg) pathway involved in plant defense and the CLAVATA (CLV) pathway involved in stem cell homeostasis. Also, a functional analysis of the CORYNE (CRN) protein was performed to assign functions to the different protein domains of this putative pseudokinase. Furthermore, a study on the effects of different fluorophore linkers in plant cells was performed to determine a linker that allows for the best compromise between a high Förster (Fluorescence) Resonance Energy Transfer (FRET)-efficiency and fast protein maturation. Finally, the conventional two-fluorophore FRET Acceptor PhotoBleaching (APB) technique was developed further into a two-FRET-pair three-fluorophore technique that enables the detection of trimeric protein complexes or the measurement of a protein-protein interaction with the corresponding negative (or positive) control in the exact same cell. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie » Entwicklungs- und Molekularbiologie der Pflanzen | |||||||
| Dokument erstellt am: | 02.04.2015 | |||||||
| Dateien geändert am: | 02.04.2015 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 26.08.2014 | |||||||
| Datum der Promotion: | 18.11.2014 |
