Dokument: Genexpression in humanen Skelettmuskelzellen nach Kokultur mit Adipozyten

Titel:	Genexpression in humanen Skelettmuskelzellen nach Kokultur mit Adipozyten
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2914
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20040805-000914-4
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Klähn, Miriam [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 2,89 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 09.02.2007 / geändert 09.02.2007
Beitragende:	Prof. Dr. Eckel, Jürgen [Gutachter] Prof. Dr. Scherbaum, Werner A. [Gutachter]
Stichwörter:	Myozyten, Adipozyten, Diabetes Typ II, Kokultur, Genexpression , DNA-Array, Semiquantitative RT-PCR, PDK-2, IRS-1, TroglitazonTNF-alpha, crosstalk
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibung:	Diabetesrisiko und Maß der Insulinresistenz korrelieren u.a. mit dem BMI. Fettgewebe sezerniert Adipokine, deren Muster bei Diabetes verändert ist, z.B. Tumor-Nekrose-Faktor-alpha (TNFalpha). Der Einfluss des Fettgewebes auf die Insulinsensitivität des Muskels, der „Crosstalk“, wurde hier an einem in unserer Arbeitsgruppe etablierten humanen „Kokultur“-Modell untersucht. Primäre Myoblasten von 3 Spendern bzw. aus weiblichem Brustfett isolierte Präadipozyten von 4 Spendern (BMI 23 - 26 kg/m2) wurden in vitro ausdifferenziert und 48 Stunden kokultiviert. So induzierte Änderungen der mRNA-Expression von 26 Genen u.a. der muskulären Insulin-Signalkaskade wurden mit einem radioaktiven cDNA-Array analysiert. In einer semiquantitativen Multiplex-RT-PCR wurde der Einfluss von TNF-alpha und dem Thiazolidindion Troglitazon auf die Expression von IRS 1 (Insulin-Rezeptor-Substrat 1) und des TNF-Rezepors getestet. Der Skelettmuskel exprimiert überwiegend mRNA der TNF-Rezeptor-Isoform 1, deren Menge sich durch die TNF-alpha-Behandlung nicht ändert. Die IRS-1-Expression war nach TNF-alpha- oder Troglitazon-Applikation unverändert. Eine Zeitkinetik über 48 Stunden zeigte keinen Troglitazon-Einfluss. Die im Modell von Dietze et al. [2002] durch TNF -alpha; bzw. Troglitazon induzierte Änderung der IRS 1-Proteinexpression beruht demnach nicht auf einer Genexpressionsänderung. Für Pyruvate-Dehydrogenase-Kinase 2 (PDK-2) wurde eine mRNA-Abnahme ohne ein Korrelat auf der Proteinebene gefunden. Eine TNF-alpha-Behandlung, dessen apoptotische Wirkung auf die Zellen durch Fluoreszenzfärbungen ausgeschlossen wurde, ergab bei 2 Spendern eine geringe, auf Transkriptionsebene nicht reproduzierbare Abnahme der Proteinmenge. Vielleicht ist die Wirkung der Adipozyten auf die PDK-2 der Myotuben nicht TNF-alpha-vermittelt. An der PDPK-1 ließ sich der individuelle Einfluss zweier Fettzellspender auf die Genexpression eines Muskelzellspenders zeigen. Die AKT 2-mRNA wurde doppelt so stark exprimiert, wie AKT 1-mRNA, durch die Kokultur bzw. TNF-alpha wurden keine Änderungen erzeugt. Dies ergänzt die auf Proteinebene angestellten Untersuchungen von Dietze et al. Die Induktion der Vergleich starken Cyclin-D1-Transkription durch Insulin-Zusatz im Medium kann unter den gewählten Bedingungen nicht ausgeschlossen werden, in der Kokultur ergaben sich aber keine Veränderungen. Auch für c jun, c myc und c-fos traten keine Genexpressionsänderungen auf. Insgesamt lassen die hier an Skelettmuskelzellen angestellten Untersuchungen zur Induktion der Insulinresistenz im Muskel durch Adipozyten und das Zytokin TNF-alpha; schließen, dass die Transkription der untersuchten Gene nicht nennenswert beeinflusst wird so dass sich die Auswirkungen eher auf die Proteinebene beschränken dürften.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	05.08.2004
Dateien geändert am:	12.02.2007
Promotionsantrag am:	30.07.2004
Datum der Promotion:	30.07.2004