Dokument: Survivin und seine alternativen Spleißvarianten: Untersuchungen zu ihrer Bedeutung für eine Zytostatika-induzierte Apoptose und ihren molekularen Interaktionspartnern

Titel:	Survivin und seine alternativen Spleißvarianten: Untersuchungen zu ihrer Bedeutung für eine Zytostatika-induzierte Apoptose und ihren molekularen Interaktionspartnern
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2827
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20040520-000827-8
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Müller, Maureen [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 1,74 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 09.02.2007 / geändert 09.02.2007
Beitragende:	Prof. Dr. Gerharz, Claus Dieter [Gutachter] Prof. Dr. Bier, Henning [Gutachter] Prof. Dr. Germing, Ulrich [Gutachter]
Stichwörter:	Survivin, Spleißvarianten, Apoptose, Zytostatika, Interaktion
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibung:	Die Entwicklung einer Apoptoseresistenz ist einer der wichtigsten Faktoren für Progression und Therapieresistenz maligner Tumoren. Der in der vorliegenden Arbeit untersuchte Apoptose-Inhibitor Survivin ist ein in Tumoren stark überexprimiertes Protein, von dem kürzlich zwei alternative Spleißvarianten entdeckt wurden (Survivin-2B und Survivin-ΔEx3 ). Ziel der vorliegenden Untersuchung war, die Bedeutung der verschiedenen Survivin-Varianten für eine Zytostatika-induzierte Apoptose zu überprüfen und zusätzlich Aufschluß über die Art und subzelluläre Lokalisation möglicher Interaktionspartner zu gewinnen: • Um den Einfluß der verschiedenen Survivin-Varianten auf die Zytostatikaresistenz zu überprüfen, wurden zunächst HepG2-Zellen mit den Survivin-Varianten transfiziert und mit drei unterschiedlichen Zytostatika (Colchicin, Topotecan und Etoposid) behandelt. Hierbei ergaben sich lediglich für Survivin-2B, nicht jedoch für Survivin und Survivin-ΔEx3 anti-apoptotische Effekte im HepG2-Tumormodell. Interessanterweise war zuvor im gleichen Modellsystem nach Methotrexat-Exposition für Survivin und Survivin-ΔEx3 eine anti-apoptotische Wirkung und für Survivin-2B keine anti-apoptotische Wirkung nachgewiesen worden (Mahotka et al., 2002). Die verschiedenen Survivin-Varianten scheinen demnach in Abhängigkeit von der Art des eingesetzten Zytostatikums ganz unterschiedliche Effekte zu entfalten. • Im Zusammenhang mit der Apoptose-Inhibition von Survivin wird in der Literatur eine kontroverse Diskussion über die Interaktion mit Caspase-3 und –7 geführt. Diese mögliche Interaktion wurde in der vorliegenden Arbeit zum einen in vitro mittels eines Caspase-3-Aktivitätstestes und einer Ko-Immunpräzipitation, aber auch in vivo mit Hilfe des CheckMateTM Mammalian Two-Hybrid Systems überprüft. Sowohl unsere in vitro als auch in vivo erhobenen Daten deuteten auf eine fehlende direkte Interaktion zwischen den verschiedenen Survivin-Varianten und Caspase-3 und –7 in unserem Modellsystem hin. • Röntgenstrukturanalysen haben gezeigt, daß Survivin-Protein wahrscheinlich als Dimer wirksam wird. Um Survivin in vivo auf eine Interaktion mit sich selbst und mit seinen Spleißvarianten zu testen, wurde auch hier das CheckMateTM Mammalian Two-Hybrid System angewandt. Eine Assoziation mit den Spleißvarianten könnte dabei eine zusätzliche Regulationsmöglichkeit der Apoptose eröffnen. Mit Hilfe dieser Methode konnte jedoch keine Homo- bzw. Heterodimerbildung der verschiedenen Survivin-Varianten nachgewiesen werden. • Die subzelluläre Lokalisation von Survivin kann für seine Funktion und möglicherweise auch für die Prognose von Tumoren von Bedeutung sein. In der humanen Hepatoblastom-Zellinie HepG2 konnte bereits nachgewiesen werden, daß sich Survivin und Survivin-2B vorwiegend im Zytoplasma und Survivin-ΔEx3 hauptsächlich im Kern befinden. In dieser Arbeit konnte mittels Immunfluoreszenz gezeigt werden, daß dieses Verteilungsmuster auch nach Zytostatika-Behandlung beibehalten wurde.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	20.05.2004
Dateien geändert am:	12.02.2007
Promotionsantrag am:	15.03.2004
Datum der Promotion:	15.03.2004