Dokument: Untersuchungen zur Regulation und therapeutischen Beeinflussbarkeit des extrazellulären Hyaluronsäuresystems in humanen Plattenepithelkarzinomen des Ösophagus anhand eines in vivo Modells

Titel:	Untersuchungen zur Regulation und therapeutischen Beeinflussbarkeit des extrazellulären Hyaluronsäuresystems in humanen Plattenepithelkarzinomen des Ösophagus anhand eines in vivo Modells
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=25785
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20130523-084220-3
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Rieth geb. Poscher, Eva [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 5,64 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 15.05.2013 / geändert 15.05.2013
Beitragende:	Prof. Dr. Fischer, Jens Walter [Betreuer/Doktorvater] Prof. Dr. Homey, Bernhard [Gutachter]
Stichwörter:	Ösophaguskarzinom, Esophageal cancer, 4-MU, 4-Methylumbelliferon, HAS3, ESCC cells,
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibungen:	Das Ösophaguskarzinom gehört heute zu den sechs häufigsten Gründen für einen tumorassoziierten Tod der Patienten. Hyaluronsäure (HA) ist ein Polysaccharid, welches sowohl im Parenchym als auch im Stroma von humanen Plattenepithelkarzinomen des Ösophagus induziert wird. Eine überschießende Produktion an Hyaluronsäure in der Umgebung von gastrointestinalen Tumorzellen ist ein wichtiges Merkmal dieser Erkrankung. Hyaluronsäure ist für eine Vielzahl von malignen Eigenschaften von Krebszellen, wie ein erhöhtes invasives Potential, Proliferation und Neigung zur Metastasierung verantwortlich. 4-Methylumbelliferon (4-MU) ist ein Inhibitor der Hyaluronsäuresynthasen (HAS1-3), dem eine antikanzerogene Wirkung zugeschrieben wird. Die Zielsetzung der vorliegenden Arbeit war es herauszufinden, ob eine Inhibierung der HA-Synthese die Progression von Plattenepithelkarzinomen des Ösophagus beeinflusst. Es wurde eine humane plattenepitheliale Ösophaguskarzinomzelllinie (OSC1) mit einem HAS-Expressions¬muster HAS3>HAS2>>>HAS1 ausewählt Diese Zellen wurden in NMRI nu/nu Mäuse xenotransplantiert und die Effekte von 4-MU und einem lentiviralen Knockdown von HAS3 auf die Tumorprogression untersucht. Die Tumorprogression wurde mittels regelmäßiger Messungen mit Hilfe einer Schieblehre und am Ende der experimentalen Periode durch eine fpVCT quantifiziert. Anschließend wurden die Tumore histologisch auf ihren HA Gehalt, den zellulären Phänotyp, ihre Proliferation (Ki67) und Vaskularisierung (CD31) untersucht. Im Verlauf einer siebenwöchigen 4-MU Behandlung kam es zu einer Inhibition der Tumorprogression, einer Umgestaltung des Tumors in einen höher differenzierten Phänotyp sowie zu einer Abnahme von Proliferation und Vaskularisierung. Der lentivirale Knockdown von HAS3 in humanen OSC1-Zellen führte zu einer Kopie der durch 4-MU Behandlung ausgelösten Effekte in Hinsicht auf histopathologische Umgestaltung, Abnahme von Proliferation und Tumorprogression. Die Vaskularisierung blieb durch den lentiviralen Knockdown von HAS3 unbeeinflusst. Diese Ergebnisse lassen schlussfolgern, dass eine systemische Inhibition der HA-Synthese und ein spezifischer Knockdown von HAS3 in Tumorzellen eine Möglichkeit darstellen, die Progression von Ösophaguskarzinomen herabzusetzen und somit einen möglichen Ansatzpunkt für die Entwicklung neuer Therapieansätze in der Ösophaguskarzinomtherapie bieten. Esophageal carcinoma is one of the six most frequent causes of tumor related death today. Hyaluronan (HA) is a polysaccharide component that is induced in the parenchyma and stroma of human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Abundant production of hyaluronic acid (HA) in the neighbourhood of gastrointestinal cancer cells is a hallmark of tumor development. Hyaluronan accounts for a multiplicity of malignant properties of cancerous phenotype such as invasive potential, proliferation and metastatic spread. Esophageal cancer is differentiated in adenocarcinoma and squameous cell carcinoma of the esophagus. 4-methylumbelliferone (4MU) is an inhibitor of the hyaluronan synthases (HAS1-3) and is thought to have promising properties as an anticancer agent. The aim of the present study was to investigate whether inhibition of HA-synthesis affects ESCC progression. We used a squameous cancer cell line (OSC1) expressing HAS3>HAS2>>>HAS1. These human OSC1 cells were xenografted into NMRI nu/nu mice and the effect on tumor progression of 4-MU and lentiviral knockdown of HA-synthase 3 (HAS3), the main HAS isoform in ESCC, was determined. Tumor progression was monitored by caliper measurements and at the end of the experimental period by flat panel volume CT. Subsequently tumors were investigated histologically with respect to HA content, cellular composition, proliferation (Ki67) and vascularisation (CD31). During the course of 7 weeks 4-MU inhibited tumor progression; remodelling of the tumor into a differentiated tumor phenotype. Furthermore, inhibition of cell proliferation and vascularisation was observed. Lentiviral knockdown of HAS3 in human ESCC cells prior to xenografting pheno-copied the effects of 4-MU treatment with respect to histopathological remodelling, inhibition of proliferation and tumor progression. The vascularisation was not affected by lentiviral knockdown of HAS3 in human ESCC cells. That leads to the conclusion, that systemic inhibition of HA synthesis and knockdown of tumor cell HAS3 are sufficient to inhibit ESCC progression and may therefore provide a target for novel approaches to ESCC therapy.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät » Institute » Institut für Pharmakologie und Klinische Pharmakologie
Dokument erstellt am:	23.05.2013
Dateien geändert am:	23.05.2013
Promotionsantrag am:	16.12.2011
Datum der Promotion:	23.04.2013