Dokument: Charakterisierung der Adhärenzeigenschaften eines konservierten 60kDa-Membranproteins von Mycoplasma hominis

Titel:	Charakterisierung der Adhärenzeigenschaften eines konservierten 60kDa-Membranproteins von Mycoplasma hominis
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2414
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20020325-000414-9
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Papenhoff, Mike C. [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 1,33 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 30.07.2007 / geändert 30.07.2007
Beitragende:	Prof. Dr. Hadding, Ulrich [Gutachter] Prof. Dr. Köhre, Karl [Gutachter]
Stichwörter:	Mycoplasmahominis, Zytadhärenz, Membranprotein, Proteinkomplex, HIT-Protein
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibung:	Um die Rolle des speziesspezifischen Proteins P60 bei der Zytadhärenz von Mycoplasma hominis zu charakterisieren, wurde das bereits früher von unserer Arbeitsgruppe beschriebene rekombinante Fusionsprotein P60* (Weinhold, 1998), bestehend aus dem Bereich des reifen P60-Proteins, sowie der Dihydrofolatreduktase (DHFR) und 6 Histidinen als Fusionspartner, aufgereinigt und in Kompetitionsassays eingesetzt. Es zeigte sich, dass P60* die Mycoplasmenadhärenz an HeLa-Zellen im Vergleich zur reinen DHFR stärker verringerte, und dass dieser Effekt nicht auf eine rein sterische Behinderung der Adhärenz durch den DHFR-Anteil des Fusionsproteins zurückzuführen war. Der aus Mycoplasmen isolierte native Proteinkomplex, bzw. das Proteingemisch P60/P80 wurde ebenfalls in Tests eingesetzt, wobei die Adhärenz-/Inhibitionsassays eine Zytadhärenz dieser nativen Proteine vermuten ließen. Die Ergebnisse konnten jedoch nicht abgesichert werden, da sich bei den durchgeführten Kompetitionsassays ein adhärenzvermittelnder Effekt des zur Aufreinigung benutzten Detergenz NP-40 zeigte. Das im Rahmen zeitgleich von unserer Arbeitsgruppe durchgeführter Experimente generierte rekombinante Protein P60r, das als Vorläuferprotein mit Signalsequenz exprimiert wurde, ließ sich in löslicher Form aus E. coli aufreinigen und in Zell-ELISAs einsetzen. Hier zeigte sich sowohl eine Adhärenz des Proteins an Epithelzellen, als auch eine kompetitive Inhibition der Mycoplasmenadhärenz an HeLa-Zellen durch Zugabe des Proteins. Das oberflächenlokalisierte P60-Protein wurde in den Experimenten dieser Arbeit als weiteres an der Zytadhärenzvermittlung von M. hominis beteiligtes Protein identifiziert. Die Analyse der biologischen Bedeutung dieses adhäsiven Proteins, z.B. im Rahmen einer Infektion, sowie die Funktion des P60/P80-Proteinkomplexes in Wechselwirkung mit dem zytoplasmatischen HIT-Protein ("Histidine-Triad") wird nun Gegenstand weiterer Untersuchungen sein.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	25.03.2002
Dateien geändert am:	30.07.2007
Promotionsantrag am:	25.03.2002
Datum der Promotion:	13.06.2007