Dokument: Charakterisierung rekombinant exprimierter Fragmente des „Disrupted in Schizophrenia 1“ (DISC1) Proteins sowie Generierung und Charakterisierung monoklonaler Mausantikörper gegen DISC1
| Titel: | Charakterisierung rekombinant exprimierter Fragmente des „Disrupted in Schizophrenia 1“ (DISC1) Proteins sowie Generierung und Charakterisierung monoklonaler Mausantikörper gegen DISC1 | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=23556 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20130121-171305-1 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Hendriks, Philipp [Autor] | |||||||
| Dateien: |
| |||||||
| Beitragender: | Prof. Dr. Carsten Korth [Betreuer/Doktorvater] | |||||||
| Stichwörter: | DISC1, Schizophrenie | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | „Disrupted-in-Schizophrenia-1“ (DISC1) ist eines der interessantesten Risikogene für
Schizophrenie, Depression und bipolare Erkrankungen. Seine Genprodukte bestehen aus einer Reihe von Spleißvarianten und putativen Fragmenten, welche einer ausgesprochen komplexen zeitlichen und kompartimentären Expression unterliegen. Die DISC1 Proteine fungieren wahrscheinlich als zentrale Adapter und Regulatoren in neuronalen Entwicklungs- und Funktionsabläufen. Da strukturelle Eigenschaften des DISC1 Proteins relativ schlecht erforscht sind, war es Ziel dieser Arbeit rekombinante, C-terminale Fragmente von DISC1 zu exprimieren und zu charakterisieren. Diese wurden ausgewählt, da der Verlust des C-terminalen Anteils des DISC1 Proteins mit einem erhöhten Risiko für psychiatrische Erkrankungen assoziiert ist und die Funktionen und Struktur, speziell des C-terminalen Proteinanteils hier von besonderer Bedeutung sein könnten. Dabei wurden als wertvolle, molekulare Werkzeuge auch monoklonale Antikörper gegen DISC1 charakterisiert. Diese zeigten Unterschiede im Bindungsverhalten von Fragmenten mit dem natürlich vorkommenden Polymorphismus S704C des DISC1 Gens. Dieser Polymorphismus (SNP) wurde in mehreren Studien unter Anderem mit einem erhöhten Risiko für Schizophrenie assoziiert. Des Weiteren wurde ein völlig neuartiger anti-DISC1 Antikörper namens „3D4“ in einem standard Hybridomafusionsprotokoll generiert. In E.coli exprimierte DISC1 Fragmente zeigten in PAGE und SEC eine Aufspaltung in verschiedene Proteinspezies bestehend aus Dimeren, Oligomeren und hochmolekularen Multimeren. Unter denaturierenden Bedingungen in der SDS-PAGE lösten sich die hochmolekularen Spezies zu Gunsten von Monomeren und SDS-resistenten Dimeren auf.„Disrupted-in-Schizophrenia-1“ (DISC1) is one of the most interesting risk-genes for developing schizophrenia, major depression and bipolar disorder. It‘s gene products consist of several splicing variants and putative protein fragments with highly complex patterns of expression. Presumably the DISC1 proteins act as important adapter and regulative molecules, involved in neuronal development and function. DISC1 protein structure is relatively poorly understood. Therfore in this thesis, several C-terminal fragments of DISC1 have been expressed recombinantly in E. coli and characterized afterwards. The fragments were chosen, because the loss of a C-terminal portion of the protein has been associated with high risk of developing psychiatric disorders and therefore C-terminal functions and structure could be of special interest. Monoclonal antibodies were important molecular tools in this task. Several antibodies against DISC1 have been characterized. They showed differences in binding to fragments containing the natural polymorphism S704C of the DISC1 gene. This polymorphism (SNP) has been associated with elevated risk for developing schizophrenia in several studies. Additionally, a new anti-DISC1 antibody named „3D4“ has been generated using a standard hybridoma fusion protocol. Recombinantly expressed fragments of DISC1 showed forming of several, disctinct protein species including dimers, oligomers and high molecular weight multimers in PAGE and SEC. Under denaturizing conditions during SDS-PAGE, the number of high molecular weight species was reduced in favour of monomers and SDS-resistant dimers. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät » Institute » Institut für Neuropathologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 21.01.2013 | |||||||
| Dateien geändert am: | 21.01.2013 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 01.11.2012 | |||||||
| Datum der Promotion: | 07.01.2013 |
