Dokument: Role of fibronectin in platelet adhesion and aggregation: impact of biomechanics and β3 integrin on fibrillogenesis
| Titel: | Role of fibronectin in platelet adhesion and aggregation: impact of biomechanics and β3 integrin on fibrillogenesis | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=23335 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20121221-125741-3 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Englisch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Huynh, Khon [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. med. Scharf, Rüdiger E. [Gutachter] Prof. Dr. Willbold, Dieter [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibungen: | Die Beziehung zwischen der Konformationsänderung des Fibronektins und seiner Funktion bzw. Funktionsänderung während der Plättchenadhäsion und –aggregation stand im Fokus dieser Arbeit. Um diese Konformations-Funktions-Beziehung eingehend zu untersuchen, wurden die Beteiligung der β3-Integrine, die Aktinpolymerisation und der Scherstress als Steuerelemente der Fibronektinkonformation an adhärenten Plättchen im Detail analysiert.
In dieser Arbeit wird gezeigt, dass Fibronektin eine duale Rolle in der Hämostase spielen kann. Auf der einen Seite setzt Fibronektin die Plättchenaggregation herab, während es auf der anderen Seite die Plättchenadhäsion fördert. Dazu wurde zusätzlich die Entfaltung von Fibronektin auf der Oberfläche von adhärenten Plättchen und Plättchen in Suspension in vitro mittels Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer (FRET) untersucht. Die Ergebnisse belegen, dass adhärente, aber nicht Plättchen in Suspesion Fibronektin entfalten können. Diese Beobachtung legt die Schlussfolgerung nahe, dass es eine Wechselbeziehung zwischen Änderungen der Fibronektinkonformation und Hämostase gibt. Fibronektin wird auf adhärenten Plättchen entfaltet und fördert die Plättchenadhäsion, während es auf Plättchen in Suspension keine Konformationsänderungen zeigt. Daher kann Fibronektin als ein Gegenspieler von Fibrinogen wirken und die Plättchenaggregation inhibieren. Zytoskelettgifte oder flussdynamische Bedingungen haben gezeigt, dass die Entfaltung von Fibronektin und seine Aggregatbildung stark von der Polymerisation des Aktinszytoskeletts und vom Scherstress beeinflusst werden. Eine gesteigerte Aktinpolymerisation oder zunehmender biomechanischer Stress beschleunigen dieEntfaltung und Aggregatbildung von Fibronektin. Zusätzlich belegen die Ergebnisse, dass die β3-Integrin unter statischen und flussdynamischen Bedingungen unterschiedlich an der Fibronektinentfaltung und Aggregatbildung auf adhärenten Plättchen beteiligt sind. Unter statischen Bedingungen sind αvβ3 und αIIbβ3 gleichermaßen an der Entfaltung von Fibronektin beteiligt, dies, obwohl αvβ3 weniger auf der Plättchenoberfläche exprimiert wird als αIIbβ3. Dennoch unter sehr hohen Flussgeschwindigkeiten das zeigen die hier vorgestellten Ergebnisse, übt αvβ3 eine bedeutsamere Rolle bei der Initiierung der Aggregatbildung aus, während αIIbβ3 eine dominante Rolle in der späten Phase der Aggregatbildung hat. Darüber hinaus unterstützen die Ergebnisse die Hypothese, dass mehr als ein Integrin benötigt wird, damit Fibronektin auf Plättchen entfalten wird und sich Aggregate bilden können.My studies are to establish the relationship between conformational changes of Fn and its role in platelet adhesion and aggregation. After found out the relationship, my further studies were to characterize the effect of β3 integrins, actin polymerization, and shear stress on the conformational changes of Fn on adherent platelets. Fn was observed to play a dual role in hemostasis by decreasing platelet aggregation but enhancing platelet adhesion. Then, FRET was used as a tool to monitor Fn unfolding when interacting with adherent and suspended platelets in vitro. Data showed that adherent but not suspended platelets unfolded Fn during interaction. These observations lead to the conclusion that there is a relationship between Fn conformational changes and its role in hemostasis. Fn is unfolded by adherent platelets to support platelet adhesion whereas its conformation remains unchanged by suspended platelets and hence, inhibits platelet aggregation. Experiments with cytoskeletal drugs and flow had revealed that Fn unfolding and assembly are greatly influenced by actin polymerization and shear stress. Enhancing actin polymerization or increasing flow condition leads to the acceleration of Fn unfolding and assembly. There are different contributions of β3 integrins in unfolding and assembling Fn on adherent platelet under static and flow conditions. Under static condition, αvβ3 was observed to have an equal contribution as αIIbβ3 to Fn unfolding despite of its very low expression on platelet surface. However, under high flow condition, data showed that αvβ3 played more contribution in initiating the Fn assembly process whereas αIIbβ3 took the more dominant role in the later phase of progressing. Moreover, my data supported the idea that more than one type of integrins are required for Fn unfolding and assembly on adherent platelet. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 21.12.2012 | |||||||
| Dateien geändert am: | 21.12.2012 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 15.10.2012 | |||||||
| Datum der Promotion: | 06.11.2012 |
