Dokument:
Entwicklung einer tumorspezifischen
Suizidgentherapie für Neuroblastome
| Titel: | Entwicklung einer tumorspezifischen Suizidgentherapie für Neuroblastome | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2288 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20011210-000288-7 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Steffens, Sabine [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Göbel, Ulrich [Gutachter] Prof. Dr. Mehlhorn, Hans-Peter Heinz [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | Suizidgentherapie, Pharmakogentherapie,Herpes-Simplex-Virus-Thymidinkinase, Ganciclovir, Retroviren,Neuroblastome, tumorspezifischer Promotorsuicide gene therapy,pharmacogene therapy, Herpes-simplex-virus thymidine kinase, ganciclovir,retroviruses, neuroblastoma, tumor-specific promoter | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibungen: | Die Suizidgentherapie basiert auf der Gentransfer-vermittelten Expression
eines Enzyms in Tumorzellen, das eine inaktive Substanzvorstufe in einen
toxischen Metaboliten umwandelt. Als Vektormodell wurden retrovirale
Vektoren gewählt, da diese eine experimentell und klinisch gut belegte
biologische Sicherheit und Verträglichkeit aufweisen und bezüglich der
Transduktionsbedingung gut standardisierbar sind. Die Expression des
Suizidgens HSV-tk, welches für die Herpes-simplex-Virus Thymidinkinase
kodiert, sollte durch Verwendung eines Neuroblastom-spezifischen Promotors
auf die Tumorzellen beschränkt werden. Das
Tyrosinhydroxylase-Promotorfragment (PTH) erschien in transienten
Untersuchungen am besten geeignet. Für die Suizidgenexpressionsstudien
wurde das Reportergen egfp (enhanced green fluorescent protein) mit dem
Suizidgen HSV-tk fusioniert. Dabei zeigten die in-vitro-Untersuchungen
eine deutliche Korrelation zwischen HSV-TK-Aktivität und
EGFP-Fluoreszenzintensität. Sowohl in der Stärke der PTH-vermittelten
EGFP-Expression als auch in der Sensitivität gegenüber der Substanzvorstufe
Ganciclovir konnte nach retroviralem Gentransfer ein deutlicher Unterschied
zwischen humanen Neuroblastomzellen und nicht-neuronalen Zellen nachgewiesen
werden.Suicide gene therapy is based on gene transfer-mediated expression of a
prodrug-activating enzyme which catalyses production of a toxic
metabolite. Retroviral vectors are most widely used as vector system,
since their biological safety and tolerance is well documented by clinical
studies. In order to limit HSV-tk (Herpes-simplex virus thymidine kinase)
suicide gene expression to tumor cells, several promoters of neuroblastoma
marker genes were investigated for their feasibility to mediate
tumor-specific gene expression. Transient assays revealed the tyrosine
hydroxylase promoter (PTH) as most suitable. For suicide gene expression
studies, a fusion gene was generated, consisting of the reporter gene egfp
(enhanced green fluorescent protein) and the suicide gene HSV-tk. In-vitro studies revealed a significant correlation between HSV-TK-activity and EGFP-fluorescence intensity. Following retroviral transduction, there was a marked difference detectable between human neuroblastoma and non-neuronal cells in both the intensity of PTH-mediated EGFP expression as well as in the sensitivity to the prodrug ganciclovir. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 10.12.2001 | |||||||
| Dateien geändert am: | 12.02.2007 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 10.12.2001 | |||||||
| Datum der Promotion: | 10.12.2001 |
