Dokument: Strukturuntersuchungen an der FoF1-ATP-Synthase aus Escherichia coli
| Titel: | Strukturuntersuchungen an der FoF1-ATP-Synthase aus Escherichia coli | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2282 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20030204-000282-2 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Schnick, Claudia [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Strotmann, Heinrich [Gutachter] Prof. Dr. Groth, Georg [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | ATP-Synthase, c-Oligomer, Kristallisation, Tentoxin, TryptophanSubstitutionsmutagenese | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibung: | Die Untersuchung der FoF1-ATP-Synthase ist von besonderer Bedeutung für das Verständnis der Wirkungsweise des Enzyms auf molekularer Ebene. Die Struktur des hydrophilen F1-Komplexes ist weitgehend aufgeklärt, während bisher vom membranständigen Fo-Bereich eine hochaufgelöste Struktur fehlt. In der vorliegenden Arbeit wurden strukturelle Untersuchungen an der E.coli ATPase durchgeführt, da sie als Minimalmodell für ATPasen verschiedener Organismen angesehen werden kann. Untersuchungen zum Aufbau des c-Oligomers mit Hilfe der Tryptophan Substitutionsmutagenese führten zur Identifizierung inter- und intramolekularer Kontaktstellen der c-Monomere. Diese Kontakte ließen sich am besten mit einem Modell des Oligomers aus 10 Monomeren in Einklang bringen, bei dem die N-terminalen Helices nach außen orientiert sind. Zur kristallographischen Untersuchung des FoF1-Komplexes wurde ein Protokoll entwickelt, das die Isolierung eines homogenen, intakten ATPase Komplexes von hoher Reinheit ermöglicht. Die Kristallisationsexperimente lieferten sehr kleine Kristalle, die sich jedoch nicht für eine Röntgenstrukturanalyse eigneten. Weiterhin wurde durch gezielte Modifikationen am F1-Komplex die Bindung des phytopathogenen Inhibitors Tentoxin ermöglicht. Durch die Überlagerung einer Kristallstruktur der chloroplastidären ATPase und eines E.coli Homologiemodells konnten kritische Aminosäurereste identifiziert werden, die durch sterische Konflikte die Bindung des Inhibitors verhindern. Durch gezielte Substitutionen dieser kritischen Reste konnte eine E.coli ATPase Mutante erzeugt werden, deren ATP-Hydrolyseaktivität durch Tentoxin komplett gehemmt werden kann. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 04.02.2003 | |||||||
| Dateien geändert am: | 12.02.2007 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 04.02.2003 | |||||||
| Datum der Promotion: | 04.02.2003 |
