Dokument: Herstellung einer TNF-α-überexprimierenden
Hepatomzelllinie
zur Utersuchung zellulärer Adaptationsprozesse nach oxidativem
Stress

Titel:	Herstellung einer TNF-α-überexprimierenden Hepatomzelllinie zur Utersuchung zellulärer Adaptationsprozesse nach oxidativem Stress
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2249
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20020712-000249-6
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Chovolou, Yvonni [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 7,81 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 09.02.2007 / geändert 09.02.2007
Beitragende:	Prof. Dr. Kahl, Regine [Gutachter] Prof. Dr. Kunz, Werner [Gutachter]
Stichwörter:	OXIDATIVER STRESS, TNF-α, APOPTOSE,ANTIOXIDATIVE ENZYME, HEPATOMZELLENOXIDATIVE STRESS, TNF-α,APOPTOSIS, ANTIOXIDATIVE ENZYMES, HEPATOMA CELLS
Dewey Dezimal-Klassifikation:	500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie
Beschreibung:	Tumor-Nekrose-Faktor-α (TNF-α) ist ein pleiotropes, proinflammatorisches Zytokin mit einer Vielzahl von biologischen Effekten. Die Effekte umfassen neben der TNF-α-vermittelten Zytotoxizität auch die Aktivierung von zellulären Signalwegen, die der proapoptotischen Wirkung von TNF-α entgegenwirken. Die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies spielt bei allen TNF-α-vermittelten Effekten eine wichtige Rolle. Es wird angenommen, dass TNF-α eine zentrale Rolle bei der Potenzierung eines Leberschadens durch hepatotoxische Substanzen oder ihre Metaboliten spielt. Nach der in dieser Arbeit aufgestellten Hypothese sind Leberzellen, die selbst TNF-α produzieren, vor der zytotoxischen Wirkung des eigenen TNF-α geschützt und haben auch einen besseren Schutz gegenüber anderen Substanzen, die oxidativen Stress verursachen. Zur Überprüfung dieser Hypothese wurden Rattenhepatomzellen stabil mit einer TNF-α cDNA transfiziert und anschließend mit den prooxidativ wirkenden Substanzen TNF-α, Adriamycin, H2O2 und Paraquat behandelt. Die TNF-α überexprimierenden Zellen zeigen eine komplette Resistenz gegenüber der zytotoxischen Wirkung von exogenem TNF-α und eine partielle Resistenz gegenüber dem Zytostatikum Adriamycin. Im Gegensatz dazu führte die Überexpression von TNF-α zu einer erhöhten Sensitivität gegenüber H2O2, einem direkten Mediator für oxidativen Stress. Um die Ursachen für die veränderte Sensitivität der transfizierten Zellen gegenüber oxidativem Stress zu identifizieren, wurde die Expression der antioxidativen Enzyme MnSOD, CuZnSOD, Katalase und GPx untersucht. Untersucht wurde weiterhin, ob die Überexpression von TNF-apha die Apoptoseinduktion durch prooxidativ wirkende Substanzen beeinflusst. Nach Behandlung mit exogenem TNF-α wurde nur in den H4IIE Zellen, aber nicht in den transfizierten Zellen eine apoptotische DNA-Fragmentierung gefunden. Adriamycin, H2O2 und Paraquat induzierten in unterschiedlichem Ausmaß in allen untersuchten Zellen eine DNA-Fragmentierung. Darüber hinaus wurde die Expression von bax und bcl-2, zwei Mitgliedern der Bcl-2 Familie, sowie die Expression des Tumorsuppressor Gens p53 untersucht. Die Auswertung einer cDNA Array Analyse zeigt, dass in den TNF-α überexprimierenden Zellen von den 450 analysierten Genen 8 Gene hochreguliert und 31 Gene herunterreguliert sind. Die cDNA Array Ergebnisse unterstützen die Vorstellung, dass die TNF-α Überexpression mit einer Herunterregulation antioxidativer Proteine einhergeht, und liefert Hinweise für weiterführende Untersuchungen zur Auswirkung einer TNF-α Überexpression auf Leberzellen.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie
Dokument erstellt am:	12.07.2002
Dateien geändert am:	12.02.2007
Promotionsantrag am:	12.07.2002
Datum der Promotion:	12.07.2002