Dokument: Untersuchungen zu Chromogranin A als potentielles Tumorantigen beim malignen Phäochromozytom
| Titel: | Untersuchungen zu Chromogranin A als potentielles Tumorantigen beim malignen Phäochromozytom | |||||||
| Weiterer Titel: | Chromogranin A as potential target for immunotherapy of malignant pheochromocytoma | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=21791 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20120709-092137-0 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Diplom Kouatchoua, Christiane [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. med. Schott, Matthias [Gutachter] Prof. Dr. Lammert, Eckhard [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibungen: | Es gibt keine effektiven Therapieoptionen für die Behandlung von metastasierten neuroendokrinen Tumorerkrankungen wie dem malignen Phäochromozytom und Paragangliom, und dem medullären Schilddrüsenkarzinom. Im Fall des malignen Phäochromozytoms sind bisher keine Tumor-Antigene bekannt, und die klinischen Zeichen sind leider häufig unspezifisch und wenig sensitiv, was die Diagnosestellung erschwert. Daher wurde das Chromogranin A (CgA) als Tumor-assoziiertes Antigen (TAA) identifiziert, das in den meisten neuroendokrinen Tumoren stark überexprimiert wird. Eine CgA-basierte Immuntherapie in Form von dendritischen Zellen konnte angewandt werden, um eine zytotoxische Immunität zu induzieren und somit neue Behandlungsmöglichkeiten zu entwickeln. So konnte bereits eine Verminderung des Tumorwachstums bei transgenen Ret/Cal-Mäusen nach Immunisierung mit CgA beladenen dendritischen Zellen erzielt werden.
In dieser Arbeit wurden transgene Ret/Cal-Mäuse im Abstand von zwei Wochen und über einen Zeitraum von sechs Wochen mit HLA-identischen (H-2Kb), dendritischen Zellen, die mit verschiedenen CgAs beladen waren, immunisiert. Dabei wurden verschiedene Immunisierungsstrategien durchgeführt, um die Effizienz der starken immunogenen Epitope zu untersuchen. Als Kontrollpeptid diente Humanalbumin. Weil die Ret/Cal-Mäuse keine Metastasen vorwiesen, wurden ihnen Phäochromozytomzellen injiziert. Nach Applikation von Tumorzellen wurden bei den therapierten Mäusen Infiltrationen von CD8+ T-Zellen in den Tumorgeweben nachgewiesen. Dabei konnten CgA-spezifische CD8+ T-Zellen nach Immunisierung mit veränderten Peptiden detektiert werden. Außerdem wurde eine spezifische Lyse von Phäochromozytomzellen durch IFN-γ-produzierende CD8+ T-Zellen (58,3 ± 17,8 %) beobachtet. Die höchste zytotoxische Aktivität fand sich für das AS-veränderte Peptid P4 als auch für die natürlichen Epitope P2 und P3. Die Ergebnisse zeigen, dass CgAs als Zielmoleküle für eine neue Immuntherapie gegen maligne Phäochromozytome verwendet werden könnten. Außerdem könnten diese Erkenntnisse dazu dienen, eine peptidbasierte spezifische Immuntherapie mit Tumor-assoziierten Peptiden aus den Sekretgranula zu entwickeln. Diese Tumorepitope aus Sekretgranula könnten für die Entwicklung neuer Immuntherapien gegen neuroendokrine Tumore dienen, die in klinischen Studien angewandt werden könnten.There is no effective therapy option for the treatment of metastasized neuroendocrine tumors such as malignant pheochomocytoma or paraganglioma, and medullary thyroid carcinoma. In the case of malignant pheochomocytoma so far no tumor antigens are well-know, and the clinical indications are often nonspecific and, unfortunately, less sensitive, which complicates the diagnostic. Therefore, the Chromogranin A (CgA) was identified as tumor-associated antigen (TAA) which is strongly overexpressed in most neuroendocrine tumors. A CgA-based immunotherapy in the form of dendritic cells could be used, in order to induce a cytotoxic immunity and thus to develop new possibilities of treatment. So a reduction for tumor growth could be already obtained with transgenic Ret/Cal mice after immunization with CgA-loaded dendritic cells. In this work transgenic Ret/Cal mice were treated with DCs pulsed with six different CgA-peptides over a period of six weeks and at injection intervals of two weeks. Various immunization strategies have been conducted in order to investigate the efficiency of the strong immunogenic epitopes. Human albumin was monitored in control experiments. The mice were injected with pheochomocytoma cells, because initially they did not show metastases. Tetramer analyses of inginual lymphocytes showed large increases of CgA-specific CD8+ T cells in mice treated with CgA peptides. Immunhistochemistry of tumors indicated extensive infiltration by CD8+ T cells. In vitro chromium release assays revealed strong cytotoxic activity (58,3 ± 17,8 %) of IFN-γ secreting CD8+ T cells. Cold targeting analyses revealed that lysis activity of cytotoxic T cells was mainly mediated by CD8+ T cells specific for the modified peptid 4 as well as for the natural epitopes P2 und P3. This study shows that CgA can serve as target molecule for novel immunotherapies directed at malignant pheochomocytoma. These findings have additional significance for development of immunotherapies targetings secretory peptides. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie » Molekulare Parasitologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 09.07.2012 | |||||||
| Dateien geändert am: | 09.07.2012 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 03.02.2012 | |||||||
| Datum der Promotion: | 07.05.2012 |
