Dokument: Regulation und funktionelle Relevanz des Chemokins CCL17 in der Milz
| Titel: | Regulation und funktionelle Relevanz des Chemokins CCL17 in der Milz | |||||||
| Weiterer Titel: | Regulation and functional relevance of the chemokine CCL17 in the spleen | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=21671 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20120628-081408-6 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Globisch, Theresa [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Förster, Irmgard [Betreuer/Doktorvater] Prof. Dr. Proksch, Peter [Gutachter] | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | CCL17 spielt als induzierbares Chemokin bei einer Vielzahl von Immunreaktionen eine wichtige Rolle. Es vermittelt seine Wirkung über den Rezeptor CCR4 und wirkt somit auf aktivierte sowie Gedächtnis-T-Zellen (vorrangig TH2), regulatorische T-Zellen, Makrophagen und andere Zellen. In der Maus wird CCL17 normalerweise von einer Subpopulation CD11c+CD11b+CD8α- DC produziert und ist in zahlreichen Organen wie z.B. in Lunge, Haut, Lymphknoten und Peyer’schen Plaques exprimiert. Daher ist es umso interessanter, dass, obwohl in der Milz ebenfalls DC der in Frage kommenden Population angesiedelt sind, dort keinerlei CCL17-Expression beobachtet werden kann. Selbst nach Stimulation mittels TLR-Liganden oder Listerien-Infektion konnte CCL17 in der Milz kaum hochreguliert werden. Dagegen reagieren isolierte Milz-DC auf verschiedene Zytokine wie IL-4, GM-CSF oder TNFα mit einer verstärkten CCL17-Produktion.
Eine vergleichende Genexpressionsanalyse zwischen isolierten CD11c+CD11b+CD8α- CCL17-negativen Milz- und CCL17-positiven LK-DC zeigte, dass eine große Zahl Interferon-γ- (IFN-γ) induzierter Gene in der LK-DC-Population verhältnismäßig unterrepräsentiert vorliegen. Für IFN-γ konnte in Literaturdaten ein supprimierender Effekt auf die CCL17-Produktion gezeigt werden. Um zu untersuchen, ob IFN-γ in der Milz ebenfalls verantwortlich für die CCL17-Suppression ist, wurde eine CCL17/EGFP-Mauslinie mit zusätzlicher Defizienz für den IFN-γ-Rezeptor gezüchtet. Es konnte gezeigt werden, dass in dieser Linie nach TLR-Stimulation ein erhöhter Anteil der Milz-DC CCL17 produzieren. Die Behandlung von Mäusen mit dem NKT-Zell-Stimulans GalCer kann in vivo CCL17 hochregulieren; besonders drastisch ist der Effekt bei zusätzlicher IFNgR-Defizienz. Dieser Stimulation liegt mechanistisch eine systemische Induktion der Zytokine IL-4 und GM-CSF zugrunde. Die gleichzeitige Gabe von neutralisierenden Antikörpern gegen IL-4 sowie GM-CSF mit GalCer konnte der CCL17-Produktion entgegenwirken, der Einsatz von GM-CSF-defizienten Tieren sie komplett verhindern. Somit konnte für die Milz ein organspezifischer Mechanismus der CCL17-Suppression beschrieben werden, der im Normalzustand spezifisch durch IFN-γ mediiert wird, jedoch unter Umständen durch Hochregulation der Zytokine IL-4 und GM-CSF umgangen werden kann. Um Gründe für diesen Mechanismus zu finden, wurde ausserdem die Rolle von CCL17 in der Milz bei der Einleitung humoraler T-Zell-abhängiger sowie -unabhängiger Immunreaktionen untersucht. Dabei konnte aufgedeckt werden, dass CCL17 hier höchstwahrscheinlich keine Rolle spielt, da Antikörperproduktion sowie Klassenwechsel durch Abwesenheit oder Überexpression von CCL17 unbeeinflusst blieben. Ebenfalls analysiert wurde der Einfluss von CCL17 sowie CCL17-produzierender DC auf die Überlebensrate im Sepsismodell. Auch hier war CCL17 an der Pathogenese nicht ursächlich beteiligt.The inducible chemokine CCL17 plays an important role in many reactions of the immune system. CCL17 binds to the receptor CCR4 and attracts mostly activated and memory T cells with a Th2 preference, as well as regulatory T cells, macrophages and others. In mice, it is normally produced by a subset of CD11c+CD11b+CD8α- DC and is expressed in organs like lung, skin, lymph nodes (LN) and Peyer’s Patches. Therefore, it is striking that although DC of the respective population reside in the spleen, here no CCL17 expression can be detected. Even microbial challenges with TLR ligands or Listeria were shown to hardly enhance splenic CCL17 production. In contrast, isolated splenic DC are capable of an increased CCL17 production upon stimulation with cytokines like IL-4, GM-CSF or TNFα. A comparative gene expression analysis between isolated splenic CCL17-negative and peripheral CCL17-positive CD11c+CD11b+CD8α- DC uncovered that a large number of interferon-gamma (IFN-γ)-inducible genes are underrepresented in the LN DC population compared with splenic DC. IFN-γ has been shown to suppress transcription from the CCL17 promoter. To test whether IFN-γ is responsible for suppression of CCL17 production in the spleen, we crossed CCL17/EGFP mice with mice deficient for the IFN-γ receptor. It could be shown that in the absence of IFNgR, an increased frequency of CCL17-producing DC was detectable in the spleen upon TLR stimulation. Treatment of mice with the NKT cell stimulus GalCer leads to a moderate upregulation of CCL17 expression in the spleen, that was even more drastic in mice lacking IFNgR. The molecular mechanism behind this stimulation could be identified as a systemic induction of the cytokines IL-4 and GM-CSF. The simultaneous injection of neutralizing antibodies against these cytokines together with GalCer could counteract the splenic CCL17 production; in GM-CSF-deficient animals, it was completely abrogated. These findings indicate that under normal circumstances, IFN-γ suppresses CCL17 expression in the spleen specifically, but this effect can be overcome by upregulation of the cytokines IL-4 and GM-CSF. To identify the reason for this organ-specific CCL17 suppression, humoral immune responses to T-helper-dependent and T-helper independent antigens, for which the spleen is known to be of pivotal importance, were analyzed. It could be shown that splenic CCL17 expression most likely does not play a role in both scenarios, as the magnitude of antibody production and class switch recombination was unaltered in mice without CCL17 or overexpressing it upon GalCer treatment. Furthermore, the importance of CCL17 and CCL17-producing DC in a murine model of sepsis was investigated. Also in this case, the chemokine CCL17 was not essentially involved in the pathogenesis. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Sonstige Einrichtungen/Externe » An-Institute » Institut für Umweltmedizinische Forschung (IUF) an der HHU | |||||||
| Dokument erstellt am: | 28.06.2012 | |||||||
| Dateien geändert am: | 28.06.2012 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 13.04.2012 | |||||||
| Datum der Promotion: | 06.06.2012 |
