Dokument:
Molekulargenetische und physiologische Charakterisierung von
endogenen und heterologen Monocarboxylattransportern in der Hefe
Saccharomyces cerevisiae
Titel: | Molekulargenetische und physiologische Charakterisierung von endogenen und heterologen Monocarboxylattransportern in der Hefe Saccharomyces cerevisiae | |||||||
URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2160 | |||||||
URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20020624-000160-7 | |||||||
Kollektion: | Dissertationen | |||||||
Sprache: | Deutsch | |||||||
Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
Medientyp: | Text | |||||||
Autor: | Makuc, Judita [Autor] | |||||||
Dateien: |
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Beitragende: | Prof. Dr. Ernst, Joachim F. [Gutachter] Prof. Dr. Knust, Elisabeth [Gutachter] | |||||||
Stichwörter: | Saccharomyces cerevisiae,Monocarboxylattransporter, Mch, Jen1, Lactat, Pyruvat, heterologeExpression, MCT1, CD147 | |||||||
Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
Beschreibung: | Von der Hefe Saccharomyces cerevisiae wurden fünf Proteine
hinsichtlich ihrer Funktion, Regulation und Lokalisation untersucht, die
eine Ähnlichkeit zu den Monocarboxylattransportern (MCT) der
Säuger zeigen und als Monocarboxylattransporter-Homologe (Mch)
bezeichnet werden. In den mch-Einzeldeletionsmutanten und einem
mch1-5-Deletionsstamm waren die Wachstumsraten auf verschiedenen
Kohlenstoffquellen (Lactat, Pyruvat, Acetat, Glukose, Ethanol) als auch
die Aufnahme- und Sekretionsraten von Monocarboxylaten vergleichbar mit
denen des Wildtyps. Erst die zusätzliche Deletion des
Lactattransporters Jen1 führte zu einem Wachstums- und
Aufnahmedefekt von Lactat und Pyruvat. Die Transkription der MCH-Gene
wird z.T. durch Aminosäuren reguliert. Eine intrazelluläre
Lokalisation konnte für alle Mch-Proteine aufgezeigt werden.
Für Mch3 konnte eine mitochondriale Lokalisation nachgewiesen
werden. Die angenommene Funktion der Mch-Proteine als mitochondrialer
Pyruvat- oder Aminosäuretransporter konnte nicht bestätigt
werden. Für die Untersuchung von heterologen Monocarboxylattransportern wurde ein Hefestamm konstruiert, der durch die Deletion der Gene, die für die Pyruvatkinase (PYK1) und das Malatenzym (MAE1) kodieren, Pyruvat- auxotroph auf Medien mit Ethanol als Kohlenstoffquelle ist. Durch die zusätzliche Deletion des Pyruvat-/Lactattransporters JEN1 der Hefe ist die Mutante auf die funktionelle Expression eines heterologen Monocarboxylattransporters angewiesen. MCT1 der Ratte konnte in dieser Mutante funktionell exprimiert und charakterisiert werden. Die Translokation von MCT1 zur Plasmamembran als auch seine Aktivität werden durch die Koexpression von CD147, einem Protein der Immunglobulin-Superfamilie, gesteigert. Eine Interaktion zwischen den beiden Proteinen konnte mit Hilfe des 'Split-Ubiquitin'-Systems aufgezeigt werden. | |||||||
Lizenz: | Urheberrechtsschutz | |||||||
Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie | |||||||
Dokument erstellt am: | 24.06.2002 | |||||||
Dateien geändert am: | 12.02.2007 | |||||||
Promotionsantrag am: | 24.06.2002 | |||||||
Datum der Promotion: | 24.06.2002 |