Dokument: Molekulargenetische und physiologische Charakterisierung von
endogenen und heterologen Monocarboxylattransportern in der Hefe
Saccharomyces cerevisiae

Titel:Molekulargenetische und physiologische Charakterisierung von
endogenen und heterologen Monocarboxylattransportern in der Hefe
Saccharomyces cerevisiae
URL für Lesezeichen:https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2160
URN (NBN):urn:nbn:de:hbz:061-20020624-000160-7
Kollektion:Dissertationen
Sprache:Deutsch
Dokumententyp:Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:Text
Autor: Makuc, Judita [Autor]
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Dateien vom 09.02.2007 / geändert 09.02.2007
Beitragende:Prof. Dr. Ernst, Joachim F. [Gutachter]
Prof. Dr. Knust, Elisabeth [Gutachter]
Stichwörter:Saccharomyces cerevisiae,Monocarboxylattransporter, Mch, Jen1, Lactat, Pyruvat, heterologeExpression, MCT1, CD147
Dewey Dezimal-Klassifikation:500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie
Beschreibung:Von der Hefe Saccharomyces cerevisiae wurden fünf Proteine hinsichtlich ihrer Funktion, Regulation und Lokalisation untersucht, die eine Ähnlichkeit zu den Monocarboxylattransportern (MCT) der Säuger zeigen und als Monocarboxylattransporter-Homologe (Mch) bezeichnet werden. In den mch-Einzeldeletionsmutanten und einem mch1-5-Deletionsstamm waren die Wachstumsraten auf verschiedenen Kohlenstoffquellen (Lactat, Pyruvat, Acetat, Glukose, Ethanol) als auch die Aufnahme- und Sekretionsraten von Monocarboxylaten vergleichbar mit denen des Wildtyps. Erst die zusätzliche Deletion des Lactattransporters Jen1 führte zu einem Wachstums- und Aufnahmedefekt von Lactat und Pyruvat. Die Transkription der MCH-Gene wird z.T. durch Aminosäuren reguliert. Eine intrazelluläre Lokalisation konnte für alle Mch-Proteine aufgezeigt werden. Für Mch3 konnte eine mitochondriale Lokalisation nachgewiesen werden. Die angenommene Funktion der Mch-Proteine als mitochondrialer Pyruvat- oder Aminosäuretransporter konnte nicht bestätigt werden.
Für die Untersuchung von heterologen Monocarboxylattransportern wurde ein Hefestamm konstruiert, der durch die Deletion der Gene, die für die Pyruvatkinase (PYK1) und das Malatenzym (MAE1) kodieren, Pyruvat- auxotroph auf Medien mit Ethanol als Kohlenstoffquelle ist. Durch die zusätzliche Deletion des Pyruvat-/Lactattransporters JEN1 der Hefe ist die Mutante auf die funktionelle Expression eines heterologen Monocarboxylattransporters angewiesen. MCT1 der Ratte konnte in dieser Mutante funktionell exprimiert und charakterisiert werden. Die Translokation von MCT1 zur Plasmamembran als auch seine Aktivität werden durch die Koexpression von CD147, einem Protein der Immunglobulin-Superfamilie, gesteigert. Eine Interaktion zwischen den beiden Proteinen konnte mit Hilfe des 'Split-Ubiquitin'-Systems aufgezeigt werden.
Lizenz:In Copyright
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Fachbereich / Einrichtung:Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie
Dokument erstellt am:24.06.2002
Dateien geändert am:12.02.2007
Promotionsantrag am:24.06.2002
Datum der Promotion:24.06.2002
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