Dokument: Untersuchungen zur Diversität und
Lokalisation Gelsolin-verwandter Proteine des Regenwurms Lumbricus
terrestris

Titel:	Untersuchungen zur Diversität und Lokalisation Gelsolin-verwandter Proteine des Regenwurms Lumbricus terrestris
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2132
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20010625-000132-2
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Krüger, Evelyn [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 53,54 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 09.02.2007 / geändert 09.02.2007
Beitragende:	Prof. Dr. D'Haese, Jochen [Gutachter] Prof. Dr. Greven, Hartmut [Gutachter]
Stichwörter:	EWAM, Gelsolin, Actin,Actin-bindendes Protein, Actin-Modulator, Regenwurm, Lumbricus terrestris,Protein-Isoformen, schräggestreifte Muskulatur, SpermatogeneseEWAM,gelsolin, actin, actin-binding protein, actin modulator, earthworm,Lumbricus terrestris, protein isoforms, obliquely striated muscle,spermatogenesis
Dewey Dezimal-Klassifikation:	500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie
Beschreibungen:	Gelsolin-verwandte Proteine, die bei einer Reihe von Eukaryonten nachgewiesen wurden, beeinflussen den Polymerisationsgrad von Actin in einer Ca2+- und PIP2-abhängigen Weise, indem sie entweder die Nukleation von G-Actin fördern oder die Fragmentation von F-Actin bewirken. Gelsolin-verwandte Proteine treten als 40 und 80kDa- Proteine auf. In dieser Arbeit wurde das Gelsolin-verwandte Protein EWAM des Regenwurmes Lumbricus terrestris untersucht, das zu den Actin- Modulatoren mit einem Molekulargewicht von 40kDa gehört. Bei der Isolierung aus dem Hautmuskelschlauch, dem Kaumagen und den Samenblasen konnte die Existenz von Varianten des EWAM gezeigt werden, deren Expressionsmuster organabhängig ist. Die Untersuchung des immunologischen Verhaltens und der Spaltmuster nach limitierter Proteolyse bestätigten, dass es sich bei den trennbaren Varianten um Isoformen handelt. Die Identität einiger Isoformen in den unterschiedlichen Organen konnte gezeigt werden. Der Hautmuskelschlauch weist die Isoformen EWAM-P1, -P2 und -P3 auf, der Kaumagen die Isoformen EWAM-P3 und –P4, und in den Samenblasen lässt sich nur EWAM-P1 nachweisen. Die Sequenz von EWAM-P1 war bereits bekannt (Giebing et al., 1994). Mit Hilfe von PCRs mit jeweils einem Sequenz- und einem Vektor- spezifischen Primer und Phagen der cDNA-Genbibliothek des Hautmuskelschlauchs als Template gelang die Amplifizierung der codierenden Region einer weiteren Isoform. Die codierende Region umfasst 1107 bp und die abgeleitete Aminosäuresequenz 366 Aminosäuren, woraus sich ein errechnetes Molekulargewicht von 40924,1 Da ergibt. Die Aminosäuresequenz ist zu etwa 64% mit der der ersten Isoform identisch. Die Sequenzierung dieser zweiten Isoform ermöglichte durch Vergleich mit anderen Actin-Modulatoren die Identifizierung von funktionell wichtigen Domänen. Konservierte Aminosäuren in strukturell wichtigen Bereichen lassen den Schluss zu, dass das erste Segment eine ähnliche dreidimensionale Gestalt besitzt wie das erste Segment von Gelsolin. Aufgrund von Sequenzähnlichkeiten mit der potentiellen zweiten G-Actin-Bindungsstelle des vierten Segments des Gelsolins konnte eine vermutliche zweite G-Actin- Bindungsstelle des EWAM im zweiten Segment identifiziert werden. In den schräggestreiften Muskelzellen des Kaumagens gelang eine Kolokalisation mit den dünnen Filamenten. In den Stadien der Spermatogenese EWAM, Actin und Tubulin in Abhängigkeit vom Stadium der Morphogenese gezeigt werden. Für F-Actin und EWAM ergab sich eine partielle Kolokalisation. Wahrscheinlich ist EWAM also an der Umorganisation des Actins beteiligt, die notwendig ist für den Transport von Organellen und die Gestaltveränderung während der Reifung der Spermien.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie
Dokument erstellt am:	25.06.2001
Dateien geändert am:	12.02.2007
Promotionsantrag am:	25.06.2001
Datum der Promotion:	25.06.2001