Dokument:
Einfluß von Mutationen in der Leader-Region eines ribosomalen
RNA-Operons auf die Faltungskinetik und Assemblierung der kleinen
ribosomalen Untereinheit
| Titel: | Einfluß von Mutationen in der Leader-Region eines ribosomalen RNA-Operons auf die Faltungskinetik und Assemblierung der kleinen ribosomalen Untereinheit | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2060 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20010628-000060-6 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Zirwes, Oliver [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Wagner, Rolf [Gutachter] Prof. Dr. Bünemann, Hans [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | Assemblierung,Ribosomen, Leader, Kethoxal, Faltung, Struktur, Modifikation, RNA,Ribosomenbiogenese, 16S rRNA | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibung: | Die Biogenese der ribosomalen 30S Untereinheit von Escherichia coli wird durch die 5'-seitig kotranskribierte Sequenz beeinflußt. Dieser untranslatierte Sequenzbereich wird als 'Leader-Region' bezeichnet und ist an verschiedenen Prozessen regulatorisch beteiligt. Frühere Arbeiten konnten zeigen, daß Elemente in der Leader-Region Einfluß auf die Transkription des dahinter liegenden 16S rRNA-Strukturgens haben. Eine direkte Wechselwirkung der Leader-Region mit dem 5'-Bereich der 16S rRNA konnte ebenso gezeigt werden. Ein Element des Leader-Bereichs ist die sogenannte tL-Region. In dieser Region eingeführte Punktmutationen führen in vivo zur Ausprägung eines kälte-sensitiven Phänotyps. Die Kältesensitivität konnte auf die Akkumulation defekter ribosomaler Untereinheiten zurückgeführt werden. In dieser Arbeit sollten die Effekte des Leaders auf die Assemblierung der 30S Untereinheit in vitro untersucht werden. Dazu wurden folgende Experimente durchgeführt: · Durch in vitro-Assemblierungsstudien mit Vorläufertranskripten wurde der Einfluß des Leaders auf die Proteinzusammensetzung der Partikel sowohl in der Wildtyp- als auch in der mutierten Form der Transkripte untersucht. Assemblierungen unterhalb der Standardtemperatur belegten die positive Hilfestellung des Leaders bei der Proteinbindung. · Strukturuntersuchungen der assemblierten Partikel durch chemische Modifikation konnten die gewonnen Daten auf Nukleinsäure-Ebene erweitern. Bereiche, die durch den Leader in seiner jeweiligen Form (Wildtyp oder Mutante) strukturell beeinflußt werden, konnten somit eingegrenzt werden. · Zeitaufgelöste Faltungsstudien konnten die mögliche kinetische Wirkung des Leaders aufzeigen. Durch die chemische Modifikation renaturierender Transkripte wurde die unterschiedliche Wirkung beider Leaderformen auf die Geschwindigkeit der Faltung einzelner Positionen innerhalb der 16S rRNA deutlich. Die Erkenntnisse dieser Arbeit konnten eine positive Beteiligung des Leaders bei der Strukturierung der 5'-Domäne der 16S rRNA zeigen und belegen, daß es sich bei der hier untersuchten Hilfestellung um eine 'transiente' Interaktion handelt, da die Assemblierung der vollständigen 16S rRNA durch den Leader massiv gestört wird. Die Beteiligung des Leaders an der Strukturbildung des zentralen Pseudoknotens der 16S rRNA ließ sich experimentell belegen. Dabei scheint ein Teil des Leader-Bereiches bei der Synthese der frühen 16S-rRNA-Sequenzen als 'Platzhalter' zu fungieren, während ein weiterer Teil des Leaders offenbar die positiven Effekte auf die Bindung der ersten ribosomalen Proteine vermittelt. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 28.06.2001 | |||||||
| Dateien geändert am: | 12.02.2007 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 28.06.2001 | |||||||
| Datum der Promotion: | 28.06.2001 |
