Dokument: Charakterisierung von Translokation t(7;12)-HLXB9/TEL positiven akuten myeloischen Leukämien im Kindesalter und Identifizierung von Zielstrukturen des Transkriptionsfaktors HLXB9
| Titel: | Charakterisierung von Translokation t(7;12)-HLXB9/TEL positiven akuten myeloischen Leukämien im Kindesalter und Identifizierung von Zielstrukturen des Transkriptionsfaktors HLXB9 | |||||||
| Weiterer Titel: | t(7;12) rearrangement and HLXB9 expression in young childhood AMLs | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=20237 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20120125-101357-9 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Dr. Wildenhain, Sarah [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Borkhardt, Arndt [Betreuer/Doktorvater] Prof. Dr. Lercher, Martin [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | AML, Translokation, Transkriptionsfaktor | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibungen: | Akute Leukämien im Kindesalter sind häufig durch numerische oder strukturelle chromosomale Aberrationen in den leukämischen Blasten gekennzeichnet. Für das Verständnis der Leukämieentstehung, der Ausprägung unterschiedlicher Subtypen, sowie für eine adäquate Risikostratifizierung und Therapieentscheidung ist eine detaillierte molekulargenetische Charakterisierung unerlässlich. Säuglings-AMLs mit einer Translokation t(7;12) sind durch eine äußerst schlechte Prognose charakterisiert. Molekulargenetisch wird die Translokation t(7;12) durch die Bildung eines HLXB9/TEL Fusionsgens und eine starke Expression des Wildtyp HLXB9 Allels begleitet. Der Überexpression von HLXB9 wird eine entscheidende Rolle in der t(7;12) vermittelten Leukämogenese zugeschrieben.
Im ersten Teil dieser Arbeit wurden Genexpressionsanalysen an primären Knochenmarksproben von t(7;12) und 11q23/MLL pos. Patienten durchgeführt und differentiell exprimierte Gene ermittelt. Unterschiede zwischen den beiden AML-Kohorten ergaben sich zum einen in der Expression von HOX-Genen, welche ausschließlich in den 11q23 pos. Leukämiezellen verstärkt exprimiert werden. Zum anderen konnte anhand von Signalweg-Analysen gezeigt werden, dass die differentiell exprimierten Gene besonders Signalwege der Zell-Adhäsion beeinflussen. Im zweiten Teil dieser Arbeit wurden direkte und sekundäre Ziel-Gene von HLXB9 im HL60 Zellsystem beschrieben. Mittels ChIP-on-Chip Analyse wurden Promotoren identifiziert, an die HLXB9 als potenzieller Transkriptionsfaktor bindet. Mit Hilfe einer vergleichenden Genexpressionsanalyse von HLXB9 pos. und HLXB9 neg. HL60 Zellen konnte HLXB9 als transkriptioneller Repressor beschrieben und differentiell exprimierte Gene identifiziert werden. Anhand der beiden Screening-Methoden wurden vier übereinstimmende Ziel-Gene (PTGER2, IL8, ZYXIN und ETS1) identifiziert. Für diese Ziel-Gene konnte in den Array-Analysen und in der qRT-PCR gezeigt werden, dass HLXB9 an die entsprechenden Promotorregionen bindet, und dass zusätzlich die Genexpresssion der Ziel-Gene in den HLXB9 pos. Zellen vermindert wird. Für PTGER2 konnte zusätzlich mit Hilfe einer HLXB9 Deletionsmutante gezeigt werden, dass die konservierte Homöodomäne von HLXB9 für die Regulation von PTGER2 notwendig ist. Des Weiteren wurde in dieser Arbeit gezeigt, dass HLXB9 die ATRA-induzierte Expression des Differenzierungsantigens CD11b verstärkt.Blast cells of acute leukemias are mainly characterized by numerical or structural chromosomal aberrations. A detailed molecular description of the aberrant cytogenetic profile is indispensable for risk stratification and choice of optimal therapy regimen. Infant AMLs with a translocation t(7;12) are clinically characterized by a very poor outcome. The translocation t(7,12) results in a fusion transcript HLXB9/TEL and furthermore in an aberrant expression of the un-rearranged HLXB9 allele. This work is based on the assumption that HLXB9 plays a crucial role in the transformation process of t(7;12) pos. leukemias. In the first part of this thesis a comparative gene expression profiling of primary bone marrow samples from t(7;12) and 11q23/MLL positive infant AMLs was performed. Both leukemia entities can be clearly distinguished by the expression of a subset of HOX-genes, which is exclusive for the 11q23 pos. cohort. Differentially expressed genes can be attributed to pathways which interfere in cell-adhesion or related pathways. In a second part of this work we identified direct and indirect target genes of HLXB9 in a HL60 cell line system. Promoter regions, which are bound by the potential transcription factor HLXB9, were identified by ChIP-on-chip analysis. A comparative gene expression microarray analysis of HLXB9 pos. and HLXB9 neg. HL60 cells revealed that HLXB9 acts as a transcriptional repressor. Both screening methods were used to identify overlapping target genes. We identified four target genes (PTGER2, IL8, ZYXIN and ETS1), which show direct binding of HLXB9 to the corresponding promoter regions and a decreased gene expression in HLXB9 pos. cells as well. A functional homeodomain of HLXB9 is essential for the regulation of the target-gene PTGER2. Additionally, this study demonstrated that HLXB9 is able to increase the ATRA-induced expression of the myeloid differentiation antigen CD11b. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 25.01.2012 | |||||||
| Dateien geändert am: | 25.01.2012 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 19.04.2011 | |||||||
| Datum der Promotion: | 30.05.2011 |
