Dokument: Die Suppression der endothelialen Entzündungsantwort surch CpG-DNA

Titel:	Die Suppression der endothelialen Entzündungsantwort surch CpG-DNA
Weiterer Titel:	Suppression of inflammatory response by CpG-DNA
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=19958
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20111209-142315-7
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Zahner, Lisa [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 437,7 KB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 28.11.2011 / geändert 28.11.2011
Beitragende:	Prof. Dr. Kolb-Bachofen, Victoria [Gutachter] Prof. Dr. med. C. MacKenzie [Gutachter]
Stichwörter:	CpG-DNA, Endothelzellen, Entzündung, Suppression, Makrophagen, IL-6, IL-8, IFN-beta
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibung:	Toll like Rezeptoren (TLRs) erkennen Teile von Krankheitserregern als körperfremd, TLR9 reagiert speziell auf bakterielle CpG-DNA. In Immunzellen lösen sie folgerichtig eine Aktivierung des Immunsystems aus, in der humanen immortalisierten Endothelzellreihe HMEC-1 kommt es nach Inkubation mit CpG-DNA überraschend zu einer verminderten Freisetzung von IL-8 (Fitzner et al., 2008), was eine Suppression des Immunsystems bedeutet. Ziel dieser Arbeit war es nachzuweisen, dass der immunsuppressive Effekt von CpG-DNA in Endothelzellen zellspezifisch nur in diesen zu beobachten ist und sequenzspezifisch auf CpG-DNA D19chimäre (Typ A CpG-DNA) begrenzt ist. Zunächst wurde mittels Alamar Blue Färbung nachgewiesen, dass CpG-DNA keinen zytotoxischen oder proliferationssenkenden Effekt auf HMEC-1 zeigt. Alle Versuche wurden mit ruhenden und durch proinflammatorische Zytokine voraktivierte Zellen durchgeführt, so war ein Vergleich zwischen normalen und entzündlich veränderten Zellen möglich. Ruhende sowie aktivierte HMEC-1 zeigten in 3 voneinander unabhängigen Versuchen eine signifikante IL-8 Sekretionssenkung auf steigende Konzentrationen von CpG-DNA D19chimäre. Auch eine Suppression der IL-6 Sekretion in aktivierten HMEC-1 konnte nachgewiesen werden. Die ruhenden Zellen sezernierten hierfür insgesamt zu wenig IL-6. Die primäre Endothelzellreihe HDMEC zeigte ruhend und aktiviert eine supprimierte IL-6 Sekretion nach CpG-DNA D19chimäre. Der immunsuppressive Effekt ist also nicht auf IL-8 begrenzt. Zum Nachweis der Zellspezifität dieser immunsuppressiven Reaktion von humanen Endothelzellen auf CpG-DNA D19chimäre wurden bei gleichen Versuchsbedingungen die humanen Makrophagenzelllinien MM6 und THP-1 auf ihre IL-8 Sekretion nach CpG-DNA Inkubation untersucht. Die IL-8 Freisetzung war hier bei steigender DNA Konzentration durchgängig steigend. Auch eine weiterhin durchgeführte Real Time PCR auf IFN-β bestätigte diese Unterschiede zwischen Endothelzellen und Makrophagen. Zum Nachweis der Sequenzspezifität wurden neben der CpG-DNA D19chimäre weitere DNAs untersucht, die sich jeweils im genauen Aufbau (CpG DNA D19PDE) oder in Aufbau und Sequenz (Kontroll-DNAPDE, Kontroll-DNAPTO) unterscheiden. Kontroll DNAPTO konnte als einzige Kontrolle in ruhenden MM6 eine gesteigerte IL-8 Freisetzung erreichen. Dieser Effekt war bei aktivierten MM6 im Gegensatz zur CpG-DNA D19chimäre allerdings aufgehoben. Eine weitere Ausnahme bildeten die ruhenden THP-1 die auf alle Kontroll DNAs eine gesteigerte IL-8 Sekretion zeigten, diese war aber bei den aktivierten THP-1 wiederum nicht reproduzierbar. Die Reaktion der untersuchten 4 humanen Zellarten zeigt also für den immunsuppressiven Effekt eine Zellspezifität der Endothelzellen und für CpG-DNA D19chimäre insgesamt eine Sequenzspezifität vor allem bei voraktivierten Zellen.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Bezug:	10/07 - 11/11
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät » Institute » Institut für Molekulare Medizin
Dokument erstellt am:	09.12.2011
Dateien geändert am:	09.12.2011
Promotionsantrag am:	09.08.2010
Datum der Promotion:	21.11.2011