Dokument: Glukokinase als neues Zielgen des kanonischen Wnt-Signalwegs in Insulinproduzierenden Beta-Zellen des Pankreas
| Titel: | Glukokinase als neues Zielgen des kanonischen Wnt-Signalwegs in Insulinproduzierenden Beta-Zellen des Pankreas | |||||||
| Weiterer Titel: | Glucokinase as a new target gene in insulin-producing pancreatic beta-cells | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=18086 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20110502-085839-8 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Wölk, Andreas [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Scherbaum, Werner A. [Gutachter] PD Dr. Meißner, Thomas [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | Glukokinase, wnt, beta-zellen, target gene, Zielgen, betacells | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit | |||||||
| Beschreibungen: | Das Ziel dieser Studie war, den Effekt von Adipozyten entstammenden
Wnt-Signalmolekülen auf die Glukokinasetranskription in Beta-Zellen des Pankreas zu untersuchen. Mittels transienter Transfektion wurde an einer Ratten-Insulinoma-Zelllinie (INS-1) die Effekte des kanonischen Wnt-Signalwegs untersucht. Menschliche Fettzellen wurden isoliert, um Fettzellstimuliertes Medium (FCCM) zu erzeugen. Die partiell glukosesensitiven INS-1 Zellen wurden in RPMI 1640 Medium mit 7 mM Glukose, 10% FKS, 1% Penicillin/Streptomycin kultiviert, und mit folgenden Plasmiden und Zusätzen transfiziert/stimuliert: pRLTK, TOPFLASH(TF), β-CateninS45A, pRGP1003(GK), pPAR-γ (50ng), Troglitazon 10 μmol, FCCM in 1/3 und 2/3-Verdünnung sowie unverdünnt. Der kanonische Wnt-Signalweg ist in INS-1 Zellen intakt und aktiv. Die Kotransfektion von GK und β-Catenin S45A führt nur zu einer signifikanten Erhöhung der Aktivität von Glukokinase, wenn gleichzeitig pPAR-γ anwesend ist. Troglitazon stimuliert die Aktivität von GK unter diesen Bedingungen maximal, eine weitere Steigerung der β-Cateninmenge führt zu keiner signifikanten Steigerung der Aktivität. Die Stimulation von mit GK transfizierten INS-1-Zellen mit FCCM führt in Anwesenheit von pPAR-γ zu einem signifikanten Anstieg auf 134% der Ausgangsaktivität (p=0,048923), ohne pPAR-γ führt FCCM zu einem Abfall der GK-Aktivität auf 34% der Ausgangsaktivität (p=0,008149). In der vorliegenden Studie konnte erstmals gezeigt werden, daß Glukokinase ein Zielgen des kanonischen Wnt-Signalwegs in β-Zellen ist. β-Catenin fungiert in insulinproduzierenden Zellen als Aktivator für die Transkription des Glukokinasegens.In this study, the effect of adipocyte derived wnt-signalling molecules on glucokinase transcription in pancreatic beta-cells has been investigated. Using transient transfection, the effects of the canonical wnt-signalling pathway have been investigated in a rat insulinoma cell line (INS-1). Human fat cells were isolated to produce fat-cell conditioned medium (FCCM). The partial glucose-sensitive INS-1 cells were cultivated in RPMI 1640 medium with 7 mM clucose, 10% fetal bovine serum, 1% Penicillin/Streptomycin and transfected / stimulated with the following plasmids and additives: pRLTK, TOPFLASH(TF), β-CateninS45A, pRGP1003(GK), pPAR-γ (50ng), Troglitazon 10 μmol, FCCM in 1/3 and 2/3-dilution as well as undiluted. The canonical wnt-signalling pathway in INS-1 cells is intact and active. The cotransfection of GK and β-Catenin S45A does only result in a significant rise of activity of glucokinase-transscription if pPAR-γ is present simultaneously. The maximal stimulation of glucokinase gene activity is observed when adding Troglitazon, simultaneous stimulation with β-Catenin S45A and Troglitazon does not lead to a significant rise of activity. Stimulation of GK-transfected INS-1 cells with FCCM in the presence of pPAR-γ leads to a significant increase (134% of base activity, p=0,048923), without pPAR-γ FCCM causes a decrease of GK-gene activity of 34 % of base activity (p=0,008149). In this study, Glucokinase (GK) has been shown to be a target gene of the canonical wnt-signalling pathway in insulin-producing β-cells. β-Catenin does function as activator for the Transcription of the Glucokinase gene in pancreatic insulin-producing β-cells. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Medizinische Fakultät | |||||||
| Dokument erstellt am: | 02.05.2011 | |||||||
| Dateien geändert am: | 02.05.2011 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 26.11.2010 | |||||||
| Datum der Promotion: | 14.04.2011 |
