Dokument: Immunolokalisation von Neuropeptid Y in der dentalen Pulpa unterschiedlicher Altersklassen nach neonataler, systemischer Capsaicin-Applikation

Titel:	Immunolokalisation von Neuropeptid Y in der dentalen Pulpa unterschiedlicher Altersklassen nach neonataler, systemischer Capsaicin-Applikation
Weiterer Titel:	Immunohistological changes observed over time in sympathetic nerve fibers after neonatal capsaicin treatment
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=11078
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20090423-103842-8
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Bergmann, Nora [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 18,26 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 21.04.2009 / geändert 21.04.2009
Beitragende:	Prof. Dr. Raab, Wolfgang H.-M. [Gutachter] Prof. Dr. Hugger, Alfons [Gutachter]
Stichwörter:	Immunhistochemie, Pulpa, Capsaicin
Dewey Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften » 610 Medizin und Gesundheit
Beschreibungen:	Das Pflanzenextrakt Capsaicin bindet an einen unselektiven Kationenkanal, den so genannten Vanilloidrezeptor. Nach Capsaicingabe kommt es in peripheren Axonendigungen zu einer Ausschüttung von Substanz P und Cotransmittern. Dabei können hohe Konzentrationen capsaicinempfindliche Nervenfasern selektiv zerstören. In der Pulpa dentis werden durch die Applikation von Capsaicin sowohl A-δ als auch C-Fasern irreversibel blockiert. Die genaue physiologische Auswirkung der daraus resultierenden Innervationsblockade auf die Funktion der pulpalen Zellen ist bis heute ungeklärt. In einer Vorstudie hat sich gezeigt, dass es durch den funktionellen Ausfall der nozizeptiven Fasern nach neonataler Capsaicingabe eine Störung in der Dentinbildung gibt. In einer weiteren Untersuchung zeigte sich eine Veränderung der pulpalen Mikrozirkulation durch eine Ausschüttung von Neuropeptiden nach Aktivierung des vegetativen Nervensystems. Unter dem Einfluss von Capsaicin kommt es zu einer Abnahme des Blutflusses. In dieser Studie sollte die Ausschüttung von Neuropeptid Y im Alterungsprozess zwischen 30 und 155 Tagen bei mit Capsaicin desensibilisierten Wistar-Ratten beobachtet werden. Es wurde das Pulpengewebe von vier Versuchsgruppen und vier Kontrollgruppen zur Untersuchung herangezogen. Jede Gruppe besteht aus zwölf Wistar-Ratten. Alle Tiere der Versuchsgruppen erhielten bis zum dritten Lebenstag eine subkutane Capsaicinapplikation von 50 mg/kg Körpergewicht. Die Tiere jeweils einer Versuchsgruppe und einer Kontrollgruppe wurden zum gleichen Zeitpunkt mittels Intravitalperfusion nach 30, 60, 90 und 155 Tagen geopfert. Das Pulpengewebe des linken ersten Unterkiefermolars wurde zur Immunhistochemie mittels Avidin-Biotin-Peroxidasemethode herangezogen und drei Pulpengebiete (das distale Pulpenhorn, das Pulpencavum und die mesiale mittlere Wurzelpulpa) analysiert. Um die Ausschüttung von Neuropeptid Y zu untersuchen, wurde Anti-Neuropeptid Y als Antikörper herangezogen. Die Auswertung zeigte, dass es in den untersuchten Pulpengebieten der unterschiedlichen Altersstufen eine verschieden hohe NPY-Ausschüttung gab. Die Menge der NPY-Immunreaktionen war bei den Kontrollgruppen höher als in den Versuchsgruppen. Die geringste Ausschüttung erfolgte im Pulpenhorn, gefolgt vom Pulpencavum. Diese beiden Gebiete zeigten in der Versuchsgruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe eine starke Reduktion in der NPY-Freisetzung. In der Wurzelregion fand sich die größte Menge NPY-immunoreaktiver Fasern. Die höchste Ausschüttung von NPY erfolgte in der Kontrollgruppe im Pulpenhorn und –cavum nach 60 Tagen, in der Wurzel nach 90 Tagen. Daraus lässt sich folgern, dass die NPY-Ausschüttung in der Pulpa vom physiologischen Alterungsprozess beeinflusst wird. Der Einfluss von Capsaicin auf die Wurzelregion ist gegenüber der Kronenpulpa gering. Zusätzlich konnte gezeigt werden, dass eine systemische Capsaicin-Gabe die Ausschüttung von NPY signifikant hemmt. Die fehlenden sensorischen Neuropeptide nach einer systemischen Desensibilisierung üben vermutlich einen hemmenden Effekt auf die Aktivität sympathischer Nervenfasern in der Pulpa aus. The purpose of this study was to determine if age has an influence on the reduction or elimination of sympathetic nerve fibers in the selectively desensitised rat where nociceptive innervation was systemically reduced after neonatal application of capsaicin. 48 rats served as the experimental group where capsaicin systemically applied on the 3rd postnatal day. The control group consisted of the the same number of rats who where injected with the sterile vehicle of identical value on the same day. In each group 12 animals lived to 30 days, 12 to 60 days, 12 to 90 days and 12 to 155 days of life and were sacrificed via deep anaesthesia and intravital perfusion and fixation. Jaws were dissected and immunocytochemistry was performed on frozen cryosections with primary antibodies against Neuropeptide Y (NPY) in order to localize sympathetic nerve fibers in the dental pulp of each specimen. Micrographs were produced from jaws at magnifications of 100X and 250X. Scion image was applied to micrographs of the distal pulp horn of the first molar in the left lower jaw of each animal. Here the pixel numbers per inch2 of positive-immunohistological staining was measured. SPSS was used to calculate student T-test in order to analyse differences between the experimental and control groups within each age category, while the Bonferroni Post-Hoc test was used to measure differences between age groups in the experimental group and in the control group. The results demonstrate a significant difference between the capsaicin and control at the 60 day and 90 day group, where the 30 and 155 day groups should no significant differences. As for both the pulp cavum tissue and the distal pulp horn there was a constant level of innervation in the capsaicin-treated group, whereas the control group showed a great rise in innervation at 60 days. From the results we may conclude that neonatal systemic application of capsaicin significantly reduces sympathetic innervation in pulp tissue over time in the rat compared to controls. The interpretation of these results is physiologically challenging, as this occurrence could be a direct effect on sympathetic fibers in the pulp of the capsaicin-treated rat, or more likely, an indirect effect on functional differences in sympathetic fibers due to the loss of vasodilative function after the reduction of nociceptive fibers.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Medizinische Fakultät
Dokument erstellt am:	23.04.2009
Dateien geändert am:	21.04.2009
Promotionsantrag am:	05.06.2008
Datum der Promotion:	18.03.2009