Dokument: Der Einfluss von Spleißstellen auf die Rev-abhängige HIV-1 env-Expression

Titel:	Der Einfluss von Spleißstellen auf die Rev-abhängige HIV-1 env-Expression
URL für Lesezeichen:	https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=2747
URN (NBN):	urn:nbn:de:hbz:061-20040204-000747-9
Kollektion:	Dissertationen
Sprache:	Deutsch
Dokumententyp:	Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation
Medientyp:	Text
Autor:	Kammler, Susanne [Autor]
Dateien:	[Dateien anzeigen] Adobe PDF [Details] 4,86 MB in einer Datei [ZIP-Datei erzeugen] Dateien vom 09.02.2007 / geändert 09.02.2007
Beitragende:	Prof. Dr. Pfeffer, Klaus [Gutachter] Prof. Dr. Schaal, Heiner [Gutachter] Prof. Dr. Kunz, Werner [Gutachter]
Stichwörter:	HIV-1, env-Expression, spleißen, U1 snRNA, Exon splicing enhancer
Dewey Dezimal-Klassifikation:	500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie
Beschreibung:	Bei der Replikation des Retrovirus HIV-1 müssen neben gespleißten auch intronhaltige virale Transkripte in das Cytoplasma der Wirtszelle exportiert werden. Dazu gehört die env-mRNA, die für das virale Hüllprotein gp120 und das Transmembranprotein gp41 kodiert. Ermöglicht wird dieser RNA-Export durch die Bindung des viralen Regulationsproteins Rev an das RRE, eine RNA-Sekundärstruktur im env-Leserahmen. Unklar war, ob Rev den RNA-Export direkt oder in Abhängigkeit von den RRE-flankierenden Spleißstellen Spleißdonor 4 und Spleißakzeptor 7 vermittelt. Um die Funktion der Spleißstellen in der Rev-abhängigen Env-Expression zu untersuchen, wurde in transienten Transfektionsexperimenten mit subgenomischen HIV-1 Konstrukten eine Mutationsanalyse der HIV-1 Spleißstellen durchgeführt. Dabei stellte sich heraus, dass die Komplementarität zwischen dem Spleißdonor 4 und der U1 snRNA mit der Stabilität der Transkripte korrelierte. Die Positionen -3 bis +8 der Exon/Intron-Grenze konnten an der Bindung zur U1 snRNA teilnehmen. Die RNA-Stabilisierung und das Spleißen ließen sich als differenzierbare Funktionen der U1 snRNA darstellen. Die Ergebnisse der Mutationsanalyse dienten als Grundlage für einen neuen Algorithmus zur Identifizierung von Spleißdonor-Sequenzen. Ein funktioneller Spleißakzeptor 7 war keine Voraussetzung für die Env-Expression, sondern stand sogar in Konkurrenz dazu. Eine Verbesserung der Spleißeffizienz führte zu einer Abnahme intronhaltiger, Rev-abhängiger Transkripte. Bei der Erkennung von 5'- und 3'-Spleißstellen spielten außerdem cis-wirkende, spleißregulierende Elemente eine Rolle.
Lizenz:	Urheberrechtsschutz
Fachbereich / Einrichtung:	Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie
Dokument erstellt am:	04.02.2004
Dateien geändert am:	12.02.2007
Promotionsantrag am:	02.02.2004
Datum der Promotion:	02.02.2004