Dokument: Charakterisierung der Benzaldehydlyase und der Benzoylformiatdecarboxylase in unkonventionellen Medien
| Titel: | Charakterisierung der Benzaldehydlyase und der Benzoylformiatdecarboxylase in unkonventionellen Medien | |||||||
| Weiterer Titel: | Characterization of benzaldehyde lyase and benzoylformate decarboxylase in non-conventional media | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=14024 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20100309-101258-1 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Englisch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Dr. Kokova, Mariya Lyubenova [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | PD Dr. Pohl, Martina [Betreuer/Doktorvater] Prof. Dr. Pietruszka, Jörg [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | benzaldehyde lyase benzoinformate decaboxylase non-conventional media | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibungen: | Gegenstand dieser Doktorarbeit ist die Charakterisierung zweier Thiamindiphosphat (ThDP)-abhängiger Enzymen, Benzaldehydlyase (BAL) und einer Variante der Benzoylformiatdecarboxylase (BFDH281A), in verschiedenen unkonventionellen Medien. Dabei stand die Ermittlung der molekularen Ursachen für die Effekte unkonventioneller Medien auf die Aktivität und Stabilität im Mittelpunkt. Hierzu wurden die Einflüsse insbesondere von wasser-mischbaren organischen Lösungsmitteln und ionischen Flüssigkeiten auf die Enzymlöslichkeit, den Kofaktorbedarf und die Enantioselektivität untersucht. Strukturelle Effekte wurden mittels Fluoreszenz- und Circulardichroismus Spektrometrie untersucht. Eine besondere Bedeutung kommen Untersuchung des Reaktionsmechanismus mittels Anfangsreaktionsgeschwindigkeitsbestimmungen, Umsatz/Zeit-Kurven Analyse sowie der Analyse der Reaktionsintermediaten durch 1H NMR Spektroskopie zu.This thesis reports an extensive investigation of the performance of two structurally similar thiamine-diphosphate dependent enzymes, BAL and BFDH281A, in various non-conventional media. The effect of cosolvents on the activity and stability was tested, followed by a series of experiment was conducted to determine the molecular reasons for the observed effects. This series included studies on the enzyme solubility, pH effects and pH-shift, cofactor requirement, enantioselectivity using two different reactions, structural studies by fluorescence and circular dichroism spectrometry and investigation of the reaction mechanism using progress curve analysis, kinetic modelling and analysis of reaction intermediates by 1H NMR spectroscopy. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie » Enzymtechnologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 09.03.2010 | |||||||
| Dateien geändert am: | 04.02.2010 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 01.03.2009 | |||||||
| Datum der Promotion: | 27.05.2009 |
